HIV抗体检及检测要点.pptVIP

HIV抗体检测及检测要点 HIV简介 HIV是HIV感染者及艾滋病（AIDS）的病原体，主要通过性接触和体液传播，HIV主要侵犯和破坏辅助性T淋巴细胞（CD4+T淋巴细胞），使机体细胞免疫功能受损，最后并发各种严重的机会性感染和肿瘤。 HIV可分为HIV-1和HIV-2两个型，均为单链RNA病毒。前者分布广泛，后者主要局限于非洲某些国家和地区。 HIV简介 人体感染HIV后，血液中最先出现HIV抗原，然后很快消失直到疾病后期才重新出现。几周后出现IgM抗体并很快消失，此后IgG抗体出现并一直存在。HIV感染的实验室诊断以抗体检测为主，病毒及相关抗原的检测为辅，后者要求高，仅限于某些研究实验室中进行。 HIV简介 HIV-抗体检测分为筛查试验和确认试验两种，筛查试验为阳性的血清必须进一步确认，确认为阳性的方可报告HIV抗体阳性。 筛查试验的要求是敏感性高，理论上要求达到100%（97%--99%），尽可能避免漏掉可能阳性的对象，相对来说，对特异性（99%）要求不是太高，允许有少量假阳性，这些假阳性可以通过重复检测和确认试验排除。 HIV抗体检测适用范围 适用于各级各类医疗机构、疾病预防控制机构、检验检疫机构、采供血机构及卫生保健机构。可作为对HIV感染者/AIDS病人的诊断、报告和处理的实验室依据。 HIV抗体检测实验室 应符合《全国艾滋病检测工作规范（2004年第二检测版）》中对检测实验室人员、建筑设施和设备等条件的要求。 应符合《实验室 生物安全通用要求》（GB 19489-2004）对II级生物安全实验室（BSL-2）的各项要求。 实验室的质量保证和实验室安全防护按《全国艾滋病检测技术规范》规定执行。 HIV抗体检测的目的 HIV抗体检测可用于监测、诊断、血液筛查。 以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。 以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV而进行的检测，包括献血员筛查和原料血浆筛查。 HIV抗体检测的要点 筛查试验阳性不能出阳性报告。 严格遵守实验室标准操作程序（SOP）。 严格按照试剂盒说明书操作。 注意防止样品间交叉污染。 常规HIV抗体检测的方法 HIV抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复检）和确认试验。 HIV抗体检测筛查试验 筛查试剂：必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合格、在有效期内的试剂。推荐使用经临床质量评估敏感性高和特异性强的试剂。 筛查方法：常用的筛查方法是酶联免疫试验（ELISA）。目前国内外主要使用第三代（双抗原夹心法）试剂，第四代ELISA HIV抗原抗体联合测定试剂已在有些国家和地区用于血源筛查，同时检测抗原抗体，可将检出时间提前4~9.1d，有利于降低血源筛查的残余危险度。 其他简便快速的HIV检测方法 明胶颗粒凝集试验（PA）：PA是HIV血清抗体检测的一种简便方法，是将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用，混匀后保温（一般为室温）。当待检样品含有HIV抗体时，经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原-抗体反应，根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。HIV-1和HIV-2抗原共同致敏的PA试剂（AFD HIV-1/2 PA），已经我国食品药品监督管理局（SFDA）注册批准。 斑点EIA或称斑点ELISA（dot-EIA）：以硝酸纤维膜为载体，将HIV抗原滴在膜上成点状，即为固相抗原。加血清样品作用，以后步骤同ELISA。阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。反应时间在10 min以内，使用抗原量少。 其他简便快速的HIV检测方法 斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验：与斑点EIA相似，也是以硝酸纤维膜为载体。区别在于不用酶标记抗体，而代之以红色的胶体金（或胶体硒）A蛋白，用渗滤法作为洗涤方法。试剂稳定，可室温长期保存。试验时不需任何设备，迅速、简便、特异性较好，敏感性约相当于中度敏感的ELISA，适用于应急检测、门诊急诊个体检测。目前已有在国内被SFDA批准注册的国外进口试剂和国内产品。一般可在10?30min内判读结果。 其他简便快速的HIV检测方法 艾滋病唾液检测卡：在硝酸纤维膜上包被人工合成的HIVgp41/gp36蛋白抗原，可同时检测含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗体，原理为酶免疫间接法。主要检测唾液中的HIV IgA与IgG抗体，敏感性特异性与ELISA相近，可避免静脉穿刺。 几种常规HIV抗体检测方法的比较 几种常规HIV抗体检测方法的比较 在感染早期，IgM抗体出现时第三代、第四代ELISA、PA、胶体硒方法优于WB，而在方法学上，