2.高效液相色谱仪及固定相、流动相.pptVIP

仪器分析课程讲义 第四节 高效液相色谱仪 目录 一、输液系统 1．贮液器 贮液罐的材料应耐腐蚀，对溶剂呈惰性，容积约为0．5—2．0L； 贮液罐放置要高于泵体； 使用过程贮液罐应密闭； 溶剂在放入贮液罐之前必须经过0．45um滤膜过滤。 2．脱气装置 作用：脱去流动相中的溶解气体。 (1)吹氮脱气法 (2)加热回流法 (3)抽真空脱气法 (4)超声波脱气法 (5)在线真空脱气法(on—1ine degasser) 三、高效分离柱 色谱柱是实现分离的核心部件。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。 常规液相色谱柱 1～6 mm，10～50 cm。 微孔填充柱 0.5-1mm 毛细管柱 30-50μm 装柱方法：有干法和湿法，按粒度20μm划分。 柱温控制 下列几种情况需要控制柱温： 法定标准分析方法中，要求保留时间具有再现性； 必须通过改变柱温来提高分离效率； 对高分子化合物或黏度大的样品； 对一些具有生物活性的生物分子； 对一些组成复杂的样品，使用二维色谱技术。 特点： 灵敏度高，可达10-9g.mL-1； 线性范围高； 可用梯度洗脱； 对流动相的流速和温度变化不敏感； 不适用于对紫外不吸收的试样； 紫外光不透过的溶剂不能用（苯等）。 特点： 通用型检测器 ;灵敏度低（10-7g.mL-1