结核病诊断T-SPOT实验-培训课件.pptxVIP

汇 报 人： 培训专业：呼吸内科 指导老师： 2016.12.14 02 结核病实验室检查及意义 目录 01. 分枝杆菌概述 02. 结核病实验室检查 03. 小结 2 分枝杆菌概述 01 3 分枝杆菌属分类 结核分枝杆菌(M.tuberculosis) 非结核分枝杆菌（NTM） 麻风分枝杆菌（M.leprae） 4 结核分枝杆菌的发现 1882年 德国柯赫医生发现结核致病菌结核杆菌 5 结核杆菌的变迁 1897年提出结核病的飞沫传播 1922年，卡介苗为预防结核病首次对新生儿接种 1945年，链霉素的问世使肺结核不再是不治之症。 …… 6 结核分枝杆菌—特点 (M.tuberculosis) 生物学主要特点： 1. 细胞壁中含有大量脂质 2.引起的疾病都呈慢性 并伴肉芽肿 3.抗酸染色阳性 7 结核病 由结核分枝杆菌引起的慢性感染性疾病 8 结核病—临床表现 9 结核病发病机制 起始期 细胞外增殖期和传播期 共生期 T细胞反应期 10 结核病发病机制 11 结核病发病机制 12 活动性结核与潜伏感染 13 结核病—诊断 实验室检查 影像检查 病理检查 + 临床 指征 14 结核杆菌实验室检查 02 结核诊断--临床应用 几乎所有的临床内科科室都需要结核的鉴别诊断： 发热待查，结核排筛 结脑的鉴别诊断 胸腹水患者待查 儿童结核 16 结核杆菌 结核病 实验室检查 细菌学检查 免疫学检查 分子生物学检查 分枝杆菌分离培养 分支杆菌药敏试验 分枝杆菌菌种鉴定 体液免疫学诊断 细胞免疫学诊断 DNA测序 DNA探针技术 聚合酶链反应（PCR） 17 结核分枝杆菌-实验室检查 涂片镜检 细菌学检查 适用于多种标本；操作简便，价格低廉。 2份痰标本直接涂片抗酸杆菌镜检阳性； 1份痰标本直接涂片抗酸杆菌镜检阳性+肺部影像学检查符合活动性肺结核表现。 肺结核治疗评估的主要依据之一 18 结核分枝杆菌-实验室检查 缺点：不能区别是否为非结核分枝杆菌 不能区别死活菌。 结核杆菌暴露于异烟肼时，某些条件会失去抗酸性，出现假阴性。 检测灵敏度较低（104-105 个细菌/毫升）。 19 结核杆菌培养 细菌学检查 传统方法：L-J固体培养基 快速培养法: 检测细菌生长过程中代谢产生的CO2或消耗的O2，显微镜直接观察、变色液体培养基等BACTEC MGIT960系统 BACTEC460系统、、Bact/ALERT 3D、ESPⅡ等。 痰培养、其他标本培养 20 结核杆菌培养 阴性培养 阳性培养 BACTEC™ MGIT™ 960/320 指示器系统 21 结核杆菌培养 1份痰标本直接涂片抗酸杆菌镜检阳性+ 1份痰标本结核分枝杆菌培养 痰涂片阴性，肺部影像学检查符合活动性肺结核影像学表现+1份痰标本结核分枝杆菌培养阳性 用于耐多药结核疗效判定 结核菌培养临床价值—确诊结核 22 抗酸杆菌培养优缺点 敏感性较直接涂片法高，理论上10-100条菌/毫升可检出阳性； 特异性较直接涂片法高，可以从菌落生长速度、色素产生初步判断非结核分枝杆菌； 分离出具有活力的纯培养物，为进一步药敏试验提供基础。 需时长，根据接种量的大小，一般2-8周才能得到肉眼可见菌落。 结果受标本保存运送时间、培养基成分和质量、前处理方法等影响， 操作较直接涂片法复杂，需经严格培训 。 需培养基凝固灭菌器、离心机、涡旋振荡器、恒温培养箱等设备。 成本是直接涂片法的7-8倍。 23 细胞免疫学检查 结核菌素皮肤试验（PPD试验） γ干扰素释放试验（T-SPOT试验） 24 免疫学检查 细胞免疫学检查 PPD--结核菌素试验 迟发型细胞超敏反应 1）方法：1:2000 OT或PPD液0.1毫升(5单位)，左前臂屈侧中部皮内注射，48-72h测量皮肤硬结的直径。 25 PPD--结核菌素试验 2）判断标准： 阴性≤4mm 弱阳性5-9mm 阳性10-19mm， 强阳性≥20mm 或局部出现水泡与坏死 26 PPD--结核菌素试验 3)结核菌素试验的意义 阴性：无结核菌感染；不能排除结核感染。 阳性：曾有结核感染，并不一定现在患病。 强阳性：活动性结核病可能 A、变态反应尚未建立；B、免疫抑制如应用皮质激素或营养不良等 27 PPD--结核菌素试验 PPD所含抗原为致病性分枝杆菌、环境分枝杆菌及卡介苗菌株所共有，其结果受到卡介苗接种及其他分枝杆菌感染的影响，特异性较差。 当出现免疫功能低下时可出现假阴性结果，敏感性低。 免疫力正常的阴性有一定意义。强阳性有一定意义。有结核变态反应、淋巴结核强阳性多。 经济、简便，