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基因工程及其应用;学习目标:; 你知道为什么能把人的基因“嫁接”到细菌上吗?你能推测出,这种基因的“嫁接”是怎么实现的吗?你能举出一些类似的、与你的生活关系很密切的例子吗?;一、基因工程的概念:
又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。;培育转基因大肠杆菌的简要过程:;培育转基因大肠杆菌的关键步骤:;二、 基因操作的工具; 限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成,如 EcoRⅠ、SmaⅠ,也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成。;什么叫黏性末端?; 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?;G A A T T C;下列是由限制酶切割形成的DNA片段,能用相应DNA连接酶将它们恢复连接的组合是;2、基因的针线——DNA连接酶;黏合只能使互补的碱基连接起来; 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因(如抗虫基因),送入受体细胞(如棉细胞),还需要有运输工具,这就是运载体。;作为运载体必须具备哪些条件?;大肠杆菌的质粒:;质粒的特点;你知道吗?;从细胞中分离出DNA;1、提取目的基因
;目的基因的提取方法;;目的基因
的mRNA;蛋白质的氨基酸序列;⑵人工合成法;2、目的基因与运载体结合;要想获得某个目的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?一个目的基因有几个黏性末端?;3、将目的基因导入受体细胞; 1)将细菌用CaCl2处理,以增大细菌细胞壁的通透性。
2)使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。
3)目的基因在受体细胞内,随其繁殖而复制,由于细菌繁殖的速度非常快,在很短的时间内就能获得大量的目的基因。;Q2:怎样对目的基因进行检测呢?; ;二、基因工程的操作步骤;小 结;四、 基因工程的应用;1、传统的遗传育种方法有哪些?;;转基因植物:;提高动物生长速度;乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷);导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠;导入人基因具特殊用途的猪和小鼠;2、基因工程与药物研制; 胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。; 干扰素治疗病毒感染简直是“万能灵药”!过去从人血中提取,300L血才提取1mg!其“珍贵”程度自不用多说。;⑵ 基因诊断与基因治疗;基因诊断——DNA探针;DNA分子杂交原理:;基因诊断——生物芯片;基因治疗——用正常的基因取代或修补病人细胞中有缺陷的基因,从而达到治疗疾病的目的;⑴ 环境监测: 基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。; 通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类,用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属,分解DDT等毒害物质。; 利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。;;转基因生物有利的方面;转基因生物有利的一面
⑴改变传统的育种方式缩短育种时间。培育出高产优质、抗病虫害、抗旱、抗盐碱,抗除草剂等特性的作物新品种。
⑵克服异源、远源杂交障碍。如可以把动物的基因,甚至人的基因组合到植物里去。
⑶生产有利于健康和抗病的食品。
⑷培育出符合人们意愿的动物新品种。
; 这种西红柿不易腐烂,不仅便于运输、贮藏,还可使其留在植株成长更长时间,充分吸收阳光,完全成熟后再运到市场销售,能保存良久并仍然具有“夏日成熟的滋味” 。; ⑴有些转基因食物含有的一些物质,可能会影响人体健康。
⑵大量的转基因生物进入自然界后很可能会与野生物种进行杂交,产生一些超级生物,从而造成基因污染。
⑶如有些作物插入抗虫基因,杀死环境中有益的生物。;转基因食品已经走进我国百姓的生活。
国内尚没有转基因作物的大规模生产
近几年我国大量从美国、阿根廷等国进口大豆,其中大部分是转基因大豆。
我国有一半以上的大豆色拉油含有转基因成分。;基因工程技术中的目的基因主要来源于;A.常用相同的限制性核酸内切酶处理目的 基因和质粒B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C.可用抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达. ;基因工程技术在培育抗旱植物用于发展沙漠农业和改造沙漠方面显示了良好的前景,荷兰一家公司将大肠杆菌中的海藻糖合成酶基因导入植物(如甜
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