1119～1124污泥和沉积物中微量大环内酯类、磺胺类抗生素、甲氧苄胺嘧啶和氯霉素的测定论文.docVIP

　　1119～1124污泥和沉积物中微量大环内酯类、磺胺类抗生素、甲氧苄胺嘧啶和氯霉素的测定论文 唐才明 黄秋鑫 余以义 彭先芝 【摘要】 利用超声波辅助萃取(USE)技术，联合固相萃取(SPE)净化浓缩以及液相色谱电喷雾串联质谱(LCESIMS/MS)技术，建立了城市污泥和河流底泥中微量痕量大环内酯类、磺胺类抗生素、甲氧苄胺嘧啶和氯霉素的多目标定量分析方法。样品经USE提取，SPE净化后，用LCESIMS/MS检测。选择C18为分析柱，甲醇、5 mmol/L醋酸铵和0.1%甲酸混合溶液为流动相，选择在ESI正电离源下多反应监测(MRM)模式检测。对比了USE和加速溶剂萃取(ASE)对抗生素的萃取效率，优化了萃取条件。结果表明: USE和ASE对所选抗生素的萃取效率相当; 而50%甲醇溶液在酸性条件下(pH 2)萃取效率最好。抗生素的方法检出限为2.2～66.9 ng/g(干重,下同); 回收率介于74.7%～111.8%之间; 相对标准偏差小于10.6%。应用此方法在广州某污水处理厂脱水污泥及某河涌底泥中检测到磺胺二甲基嘧啶、克拉霉素、脱水红霉素及罗红霉素等多种抗生素.freelan公司);ASE300加速溶剂萃取仪(美国Dionex公司);冷冻干燥仪(德国Christ公司)。 磺胺嘧啶(SDZ，≥99.0%)、磺胺甲恶唑(SMX，≥99.0%)、磺胺二甲基嘧啶(SMZ, ≥99.0%)、甲氧苄胺嘧啶(TMP，≥98.0%)、磺胺甲嘧啶(SMR，≥99.0%)、氯霉素(CAP，≥99.0%)、阿奇霉素(AZM，≥95.0%)、克拉霉素(CTM，≥95.0%)、(红霉素(ETM，≥95.0%)、罗红霉素(RTM，≥90.0%)、泰乐菌素(TYL，≥95.0%)和黄连素(BEB，≥95.0%)均为固体粉末标样，购自美国Sigma Aldrich公司。 流动相试剂： 甲醇、甲酸和醋酸铵均为色谱纯(德国Merck公司)，超纯水由Spring 超纯水系统(中国锐思捷科学仪器公司)制备;NaCl和叠氮化钠(NaN3)为分析纯，NaCl在450 ℃焙烧4 h，NaN3用甲醇清洗3次，风干备用;HLB固相萃取柱(200 g/6 L，美国H2O)标准溶液用ETM标准溶液制备，制备方法为：在红霉素标准溶液中加入适量稀H2SO4，常温下震荡4～6 h，然后用稀NaOH溶液调节pH至6，定容，4 ℃条件下保存。各个浓度的标准工作溶液由储备标准溶液序列稀释而成，4 ℃条件下避光保存，当天使用。 2.2 样品的采集、萃取与浓缩净化 在广州市某河涌采集底泥样品，在广州市某污水处理厂采集脱水污泥，样品用锡箔纸包裹，冷冻干燥后保存于-20 ℃冰柜中备用。 准确称取0.2 g干燥脱水污泥样品于10 mL离心管中，加入8 mL 50%甲醇溶液(pH 2，1 mmol/L EDTA)，涡旋混匀1 min，超声10 min后，以4000 r/min离心5 min，转移上清液;再分别用8, 5, 5 mL 50%甲醇溶液(pH 2)重复萃取3次，混合所有上清液，摇匀。 在USE萃取液中加入400 mL超纯水稀释，使溶液中有机相浓度 5%。加入2.34 g NaCl，调节pH至4.2。HLB 固相萃取柱在使用前用甲醇、丙酮、高纯水(pH 4.2)顺序淋洗3次，每次2 mL。将脱水污泥萃取液以约3 mL/min流速通过HLB萃取柱，接着，用5%甲醇溶液淋洗萃取柱，真空干燥5 min后，抗生素分析物用5 mL甲醇洗脱。洗脱液在柔和的N2气流下浓缩至0.1 mL，加入内标，用0.1%甲酸水溶液定容至1 mL，经0.2 μm针头过滤器过滤后，进行LCMS/MS分析。 2.3 色谱与质谱条件 色谱条件： Agilent Zorbax Eclipse XRD C18液相色谱柱(150 mm×3.0 mm×3.5 μm)，柱前接同性质C18预柱(4 mm, phenomenex，美国)，柱温35 ℃，流动相A 为5 mmol/L醋酸铵和0.1%甲酸混合溶液;流动相B为甲醇，流速0.25 mL/ min，进样量5 μL。梯度洗脱： 0～10 min, 10%～30% B; 10～17 min, 30%～50% B; 17～20 min, 50%～80% B; 20～25 min, 80%～100% B; 25～27 min, 100% B。柱平衡时间8 min。 质谱条件：电喷雾电离正离子模式(ESI+)，干燥气温度350 ℃，干燥气流速10 L/min，毛细管电压： 4500 V, MS1和MS2温度均为100 ℃，扫描模式：多反应监测(MRM)，每对离子扫描时间为50 ms。 3 结果与讨论 3.1 LCMS/MS条件 比较了甲醇和乙腈为