HPLC法测定双黄通痹颗粒中麻黄碱、伪麻黄碱的含量论文.docVIP

　　HPLC法测定双黄通痹颗粒中麻黄碱、伪麻黄碱的含量论文 【摘要】 目的 建立复方制剂双黄通痹颗粒中麻黄碱、伪麻黄碱的含量测定方法。方法 色谱柱为Akasil C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾（含0.3%二乙胺，磷酸调pH=3）乙腈（体积比96∶4）；检测波长为210 nm；流速为1.0 mL/min；柱温为40 ℃；进样体积为10 μL。结果 麻黄碱在25.2～504 μg/mL范围内呈良好线性关系,平均回收率为101.23%；伪麻黄碱在17.6～352 μg/mL范围内呈良好线性关系，平均回收率为99.25%。结论 本测定方法简便可行、重复性好，可用于双黄通痹颗粒中有效成分麻黄碱、伪麻黄碱的含量测定。 【关键词】 双黄通痹颗粒；麻黄碱；伪麻黄碱；HPLC . Abstract:Objective To determine the contents of ephedrine and pseudoephedrine in Shuanghuangtongbi granula. Methods HPLC ine the content of ephedrine and pseudoephedrine in Shuanghuangtongbi granula. Samples n(4.6 mm×250 mm，5 μm). The mobile phase consisted of 0.02 mol/L potassium dihydrogen phosphate (0.3% diethylamine, phosphoric acid acmodate pH3)-acetonitrile(96:4). The column temperature l/min at a detection ．Results A good linearity L of ephedrine and 17.6-352 μg/mL of pseudoephedrine for plasma ethod is simpleand quick．it P680A型高效液相色谱仪，Summit P680A型 低压四元泵，PDA100 ASI100自动进样器，Summit 柱温箱以及“变色龙”色谱工作站；Sartorius 德国赛多利斯十万分之一电子天平。 1.2 试药与试剂 双黄通痹颗粒（深圳海王药业有限公司提供，批号分别20060720；盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱对照品均购自中国药品生物制品检定所（批号分别为171241200404、110736200525）。乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。 2 方法和结果 2.1 色谱条件 色谱柱：Akasil C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：0.02 mol/L磷酸二氢钾（含0.3%二乙胺，磷酸调pH=3）乙腈(体积比96∶4)；检测波长：210 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：40 ℃。理论塔板数按盐酸麻黄碱计算大于6 000。色谱图见图1-3。 2.2 标准曲线的制备 精密称取经五氧化二磷干燥的盐酸麻黄碱对照品25.2 mg、盐酸伪麻黄碱17.6 mg分别置20 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为储备液；分别精密吸取2种储备液各0.4、0.8、2.0、4.0、8.0 mL置同一20 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液；按上述色谱条件，取对照品溶液各10 μL进行测定。以对照品的峰面积(A)为纵坐标，质量浓度（ρ）为横坐标，绘制标准曲线，求得盐酸麻黄碱回归方程：A=328.28ρ+0.095，r=0.999 7，线性范围：25.2～504 μg/mL；盐酸伪麻黄碱回归方程：A=204.73ρ+1.023，r＝0.999 6，线性范围：17.6～352 μg/mL。 2.3 供试品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷干燥的双黄通痹颗粒样品1 g，研匀，转移至三角瓶中，精密加入1 mol·L-1盐酸30 mL，超声提取30 min，抽滤，精取续滤液10 mL，用质量分数为30%的氢氧化钠溶液调pH值至12～13，用乙醚萃取(20 mL，20 mL，10 mL，10 mL)，合并萃取液，回收乙醚至适量，转移至蒸发皿中挥干溶剂，残渣加甲醇溶解并转移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以0.45 μm的微孔滤膜滤过，取续滤液即得供试品溶液。 2.4 精密度试验 取对照品溶液重复进样6次，每次10 μL。测得盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱峰面积RSD分别为0.88%、0.98%。 2.5 稳定性试验 精密吸取供试品溶液10 μL，分别在0、2、4、6、8、10、