鸡组织中硫酸粘杆菌素残留的微生物学检测方法研究.pdfVIP

samplesrespectivelywhenfortifiedwith0.02,0.05and0.20mg/kg.Theresponseforcyromazinewaslinearinthe rangeof0.01-1.00mg/kg(r=0.9997,n=7).Thewithin-dayandbetween-daycoefficientofvariationwereless than8.69%and10.05%,respectively.Themethodcanmeetthedemandofresiduedeterminationofcyromazinein chickentissues. Keywords:cyromazine;chicken;residue;HPLC 鸡组织中硫酸粘杆菌素残留的微生物学检测方法研究 温芳 ，‘肖希龙2 (1.中国兽医药品监察所，北京100081;2.中国农业大学动物医学院，北京 100094 [摘 要]在国内首次以支气管炎博代特氏菌 (Bordetellabroncbiseptica)ATCC4617作为检测菌株，用PBS提取鸡肌肉组 织，用5%硫酸提取鸡肝脏和肾脏组织中的硫酸粘杆菌素，应用一剂量法设计原理制备肌肉、肝脏和肾脏组织标准曲线。硫 酸粘杆菌素检测限肌肉组织为。.15N吮，肝脏和肾脏组织均为0.20P眺，低于我国农业部和欧盟规定的粘杆菌素最高残留 限量。肌肉、肝脏和肾脏组织标准曲线在。025^6.4Ng/mL范围内线性关系良好，r分别为。.9970.0.9994,0.9990,n=9e 以高、低(300mg/L.60mg/L按效价计)两个剂量给鸡饮水给药，肌肉高、低剂量组均未检测出硫酸粘杆菌素残留，肝脏 和肾脏低剂量组未检测出硫酸粘杆菌索残留，高剂量组0h有微量残留。 f关键词1硫幽粘杆菌素:残留检测:微生物杯碟法 粘杆菌素 (colistin)是多粘芽抱菌 (Bacilluspolymyxa)产生的一组环状多肤，该菌株于1950年被日本的 小山康夫在福冈发现。兽医临床所用硫酸粘杆菌素为其硫酸盐，可用于猪、禽、牛和羊等动物，由于其抗菌作 用强、残留低，不易产生耐药性，中国、美国、欧盟和日本等许多国家和地区批准其作为饲料添加剂或兽药。 硫酸粘杆菌素对革兰氏阴性菌有很强的抑制作用，它可治疗志贺氏痢疾杆菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、沙门 氏杆菌和普通变形杆菌引起的感染。用作饲料添加剂也可促进畜禽生长，提高饲料转化率，预防规模化养殖中 畜禽疾病的发生。随着其在养殖业中应用日益增多，动物性食品中硫酸粘杆菌素的残留问题逐步受到各国的重 视，欧盟率先制定了粘杆菌素在动物可食用组织中的最高残留限量标准，其中肌肉、用一和肾的最高残留限a标 准分别为150.150和200pg/kg。我国农业部公告第235号(发布 动《物性食品中兽药最高残留限量》)中规定 的粘杆菌素最高残留限量与欧盟的相一致。本研究初步探索一种用微生物方法检测硫酸粘杆菌素的方法，对进 一步研究制定适合我国国情、灵敏度高、简便、快捷的残留检测方法具有理论和生产实践上的重要意义。 1材 料 蓦金项目:农业部重点课题.兽药残留检测方法研究项目。 作者简介:温 芳 (年一)，女，山西大同人，硕士，主要从事牌1s药理学与毒理学研究。 通讯作老:肖希龙。6-mail:xiwxl.cau.edu — 34 一 1.1测试菌株 支气管炎博代特氏菌ATCC4617，批中国兽医药品监察所提供。 1.2 试剂和药品 硫酸粘杆菌素标准品:749pg/mg,MEIJISEIKAKAISHALTD.LotNo.COLWS-17-16;营 养琼脂.批号010820，北京化学试荆公司:营养肉汤，批号020902，中国兽医药品监察所。 1.3仪器和器皿 隔水式电热恒温培养箱，上海跃进医疗器械一厂;HOMOGENIZERAm-3组织匀浆机，日本; YXQGOI型蒸汽消毒器，山东新华医疗器械厂;LD4-2A离心机，北京医用离心机厂:721型分光光度计 山 东高密分析仪器厂:小型三用恒温水浴箱，北京市医疗设备厂:旋涡混合器，江苏太仓鹿河生化仪器厂;2XZ-0.25 型旋片式真空泵，浙江黄岩医疗器械厂:电子天平(0.01mg),Satorius公司:游标卡尺(精确度。.02mm)，北 京量用刃具厂;牛津杯 (不锈钢，高1omm，外径8.0mm，内径6.0mm)，浙江宁海城关白石医药仪器厂;陶