枯草芽孢杆菌菌种退化与其控制.pdfVIP

第 20 卷 　第 1 期 　　　　　　　　　　　西 　南 　林 　学 　院　学 　报 　　　　　　 Vo1 20 　No 1 　2000 年 3 月 　　　　　　　　　JOURNAL OF SOUTHWEST FORESTRY COLLEGE 　　　　 Mar . 2000 　 枯草芽孢杆菌菌种退化及其控制 1 2 朱天辉 ,杨佐忠 ( 1 四川农业大学 林园学院 , 四川 雅安 625014 ;2 四川省森林病虫防治检疫总站 , 四川 成都 610081) ( ) 摘要 : 以枯草芽孢杆菌 B acillus subtilis 的生物量 、拮抗效应下降为菌种退化的标 ( ) 志 ,研究了2 个菌株 BS - 3 ,PRS5 在不同培养基上及继代培养过程中的退化现象 , 同时探讨了5 种载体 、不同复壮时间对恢复 B . subtilis 生物量及拮抗效应的影响 , ( ) 结果显示 :枯草芽孢杆菌 B . subtilis 在常见的 7 种培养基中以营养贫乏的 PDA , WPA ,CMA 最易发生退化 ,SDAY 较为稳定 ,两菌株中 ,BS - 3 退化速度慢于 PRS5 ; 在供试的5 种复壮载体中 , 以“灭菌土 + 1 %蛋白胨 + 1 %葡萄糖 + 05 %酵母浸膏” 为最佳 ,且 BS - 3 的复壮速度慢于 PRS5 ,分别为 120d 和 90d . 关键词 :生物防治 ;枯草芽孢杆菌 ;丝核菌 ;青霉菌 ;水果 ( ) 中图分类号: 　Q 93 - 335 　文献标识码:A 　文章编号:1003 - 7179 2000 01 - 0031 - 05 ( ) 枯草芽孢杆菌 B acillus subtilis 是一种重要的生物拮抗菌 ,在水果贮藏保鲜上有广泛的 应用前景[ 1～7 ] . 然而在生产和应用过程中 ,菌种常发生变异 、退化 , 出现生长瘠薄 、繁殖力降 低 、抗生效应减弱甚至丧失等现象 ,特别是转管一定代数后 ,这种退化现象更为严重. 一般认 为菌种退化由菌株本身的遗传物质所控制 ,但某些外源因素是菌种变异 、退化的重要诱因 , 为此 ,本文着重研究培养基种类及继代次数与 B acillus subtilis 菌种稳定性的关系 ,并探索其 复壮的途径及保持菌种稳定性的措施. 1 　材料与方法 11 　B acillus subtilis 菌株来源 ( 1) PRS5 菌株 　分离于杉木根系土壤 ,经紫外线诱变而得 ,对 Rhizoctonia solani 有拮抗 效应 ,可控制柑桔青霉病 、梨灰霉病. (2) BS - 3 菌株 　分离于梨果实表面 ,对 Rhizoctonia solani 有拮抗效应 ,可控制柑桔青霉 病 、梨灰霉病. 12 　培养基对菌种稳定性的影响 在相同继代次数条件下 ,测定不同种类培养基与菌种退化的关系 ,共设计 7 种培养基 : ( ) ( ) ( ) ( ) 1 马铃薯葡萄糖培养基 PDA ,常规配方 ; 2 马铃薯葡萄糖蛋 白胨培养基 PPDA , 即在 ( ) ( ) PDA 中加蛋白胨 10g/ L ;