线性放大一制备液相色谱的有效技术.PDFVIP

维普资讯 冀静 藕囊 线性放大一制备液相色谱的有效技术 祝 立 群 (姜国瓦里安技术中国有限公司，北京 100031) 制备液相色谱技术做为一种能获取高纯度化合 表 1列出了在线性放大过程中的不可变参数和 物的分离技术，在最近的几年中发展很h央，与常规液 可变参数，表 2则列 出了色谱柱直径与线性放大系 相色谱分析过程不同，制备液相色谱的目的不是为了 数，样 品负荷之间的关 系，图 I则显示 了线性放大 了解混台物中各化合物的组成，而是收集被分离开的 1000倍后的结果。 组分，此时需要考虑的是产品的纯度、回收率 、操作时 表 2 线性放大时色谱柱直径与放大系数、样品负荷的关系 间等。以往由于制备色谱硬件的限制，传统的制备色 谱柱中填料的粒径较分析色谱柱大，桂效低，为了达 到相同的分离度，制备色谱桂所需的长度也较长，科 学家在分析色谱柱上优化了分离方法后，还需要在制 备色谱柱上进行二次方法优化，从而花费大量的时间 和溶剂。随着制备液相色谱技术的发展，目前的技术 已可以实现将小粒径 (5gm)的填料装填成直径至 150mm的制备色谱柱，从而使科学家无须重新开发 制备色谱的分离条件，而直接利用在分析色谱柱 (2．1 或 4．6直径)上优化的方法进行线性放大，大大节省 了方法开发的时间和放大过程所需的费用。 1 线性放大原理 从分析色谱过程放大到制备色谱过程，通常要考 虑的因素包括色谱柱尺寸 、填料、流量、操作压力 、进 样量、产品纯度 、产品回收率、色谱分离效果等，以上 的各种 目素包括可变 目素和不可变 目素。进行线性 放大的基本假设是分析色谱系统和制备色谱系统的 化学性质，传质过程都保持不变，而将进样量、流量、 图 1 线性 放大 1o00的结果 收集体积等乘 以线性放大系数。线性放大系数即为 利用线性放大方法，可 以在分析色谱柱上优化分 制备色谱柱截面积与分析色谱柱截面积之比。 离方法，并直接用到大直径的制备色谱柱，不仅可 以 表 1 线性放大过程中的可变与不可变参数 大大节约溶剂消耗，降低整个方法开发过程的费用， 可变参数 不可变参数 而且没有过程放大的风险，没有样品损失。线性放大 流量 填料砷类 样 品进样量 色谱柱长度 技术是实现从分析放大到制备过程的最有效、最快速 幢测器流动池尺寸 色谱住背压 的方法。线性放大成功的前提是放大过程中确保色 溶济消耗 样品浓度 谱柱使用相同的颗粒直径的相 同填料，如果可能使用 产品产量 回收率 系统死体积 纯度 相同的传输泵和检测器。 进样管体积 梯度 样品收集体积 操作时 间 2 制备液相色谱设备 色谱柱性能 操作温度 线性放大技术的实现对制备液相设备提出了要 ModernSd㈣ tiff Instrum ents2001 5