第十五章色谱法导论资料.ppt

周口师范学院·化学系 授课老师：刘增臣;课程内容解析;第十五章 色谱法导论;概述; 在色谱法中，将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相（固体或液体）称为固定相 ； 自上而下淋洗运动的一相（一般是气体或液体）称为流动相 ； 装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）称为色谱柱。;;色谱法的实质;色谱法的分类;3. 按分离机理分类;色谱的发展;色谱法的特点;第一节 色谱基本概念; ;二、色谱常用术语;2.基线;1.标准偏差?---即0.607倍峰高处色谱峰宽的一半(高斯曲线)。 2.半峰宽Y1/2---即峰高一半处对应的峰宽。它与标准偏差的关系为 Y1/2=2.354? 3.峰底宽度Y---即色谱峰两侧拐点上的切线在基线上截距间的距离。它与标准偏差?的关系是 Y = 4 ?;5.保留值; (2)死时间t0;(4)保留体积VR;(7)相对保留值r2,1(选择性因子α); 正构烷烃的保留指数定义为100z，z为其??数。 在相同的色谱条件下测定被测组分及两个相邻(间隔)正构烷烃的调整保留时间 ;6.分配系数K;分配系数与分配比之间的关系;第二节 色谱理论基础;;塔板理论假设： 1.在柱内一小段长度H内，组分可以在两相间迅速达到平衡。 这一小段柱长称为理论塔板高度H。 2.以气相色谱为例，载气进入色谱柱不是连续进行的，而是脉动式，每次进气为一个塔板体积（ΔVm）。 3.所有组分开始时存在于第0号塔板上，而且试样沿轴（纵）向扩散可忽略。 4.分配系数在所有塔板上是常数，与组分在某一塔板上的量无关。 简单地认为：在每一块塔板上，溶质在两相间很快达到分配平衡，然后随着流动相按一个一个塔板的方式向前移动。对于一根长为L的色谱柱，溶质平衡的次数应为： n = L / H n称为理论塔板数。与精馏塔一样，色谱柱的柱效随理论塔板数n的增加而增加，随板高H的增大而减小。;n与半峰宽及峰底宽的关系式为： n = 5.54(tR / W1/2)2 = 16 (tR / Wb)2 组分的保留时间越长，峰形越窄，则理论塔板数n越大，色谱柱效能越高。 计算出来的的n和H值有时并不能充分地反映色谱柱的分离效能，因为采用tR计算时，没有扣除死时间tM， 所以常用有效塔板数n有效表示柱效： n有效= 5.54(tR? / W1/2)2 = 16 ( tR? / Wb)2 有效板高 ： H有效 = L / n有效 ;例：已知某组分峰的峰底宽为40 s，保留时间为400 s ，计算此色谱柱的理论塔板数。 解： n = 16 ( tR / Y)2 = 16 ? （400 / 40）2 = 1600 块 ; 塔板理论是一种半经验性理论。它用热力学的观点定量说明了溶质在色谱柱中移动的速率，解释了流出曲线的形状，并提出了计算和评价柱效高低的参数。 但是，色谱过程不仅受热力学因素的影响，而且还与分子的扩散、传质等动力学因素有关，因此塔板理论只能定性地给出板高的概念，却不能解释板高受哪些因素影响；也不能说明为什么在不同的流速下，可以测得不同的理论塔板数，因而限制了它的应用。 ;二、速率理论;1.涡流扩散项 A 在填充色谱柱中，当组分随流动相向柱出口迁移时，流动相由于受到固定相颗粒障碍，不断改变流动方向，使组分分子在前进中形成紊乱的类似涡流的流动，故称涡流扩散。 ; 由于填充物颗粒大小的不同及填充物的不均匀性，使组分在色谱柱中路径长短不一，因而同时进色谱柱的相同组分到达柱口时间并不一致，引起了色谱峰的变宽。色谱峰变宽的程度由下式决定： A = 2λdp 上式表明，A与填充物的平均直径dp的大小和填充不规则因子λ有关，与流动相的性质、线速度和组分性质无关。为了减少涡流扩散，提高柱效，使用细而均匀的颗粒，并且填充均匀是十分必要的。对于空心毛细管，不存在涡流扩散，因此 A = 0。 ;2. 纵向扩散项 B / u （分子扩散项） 纵向分子扩散是由浓度梯度造成的。组分从柱入口加入，其浓度分布的构型呈“塞子”状。它随着流动相向前推进，由于存在浓度梯度，“塞子”必然自发的向前和向后扩散，造成谱带展宽。分子扩散项系数为