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丙氨酸氨基转移酶试剂使用说明书 ALT/GPT R [用 途] 本试剂用于人血清或血浆中丙氨酸氨基转移酶的活性测定。 丙氨酸氨基转移酶在肝脏有较高的含量，而在心、肾、骨骼肌、胰、脾、肺中则含量较少。丙氨酸氨基转移酶活性升高可由某些与肝脏有关的疾病，如：肝硬化、肝癌、病毒性或中毒性肝炎、阻塞性黄疸等引起。而广泛性损伤和肌肉疾病、伴有休克、氧不足的循环衰竭、心肌梗塞和溶血性疾病等也会导致丙氨酸氨基转移酶活性的升高。 [原理] 丙氨酸+2-氧代戌二酸 丙酮酸+L-谷氨酸 丙酮酸+NADH+H+ L-乳酸+NAD++H2O NADH氧化成NAD+引起340nm处吸光度的下降,其下降速率与样品中ALT活性成正比。 规格1（R1：4×60ml，R2：1×60ml），包装总量：300ml规格2（R1：2×80ml，R2：2×20ml），包装总量：200ml规格3（R1：4×20ml，R2：1×20ml），包装总量：100ml规格（R1：4×0ml，R2：1×0ml），包装总量：00ml [试剂成份] 试剂1： 试剂2： Tris缓冲液100mmol/L 2-氧代戌二酸5mmol/L L-丙氨酸0mmol/L L-丙氨酸0mmol/L LDH ≥8.5 KU/L NADH 0.3 mmol/L [试剂制备] 双试剂:无需配制,开瓶即用; 单一试剂:临用时将试剂1与试剂2按:1比例混合.[试剂稳定性和贮存] 在2-8避光条件下可稳定。。若混合后试剂空白小于1.000（以水为空白，340nm波长、1cm光径）时，表明试剂已失效。 [样品要求] 不溶血血清或肝素抗凝血浆。样品中丙氨酸氨基转移酶在2-8可稳定7天。[测定方法] 空白管（B） 样品管（U） 蒸馏水（ml） 0.---- 样 品（ml） ---- 0. 试剂1（ml） .8 0.8 混匀，37孵育1~5分钟 试剂2（ml） 混匀，37延迟1分钟后在340nm处读取吸光度值，每隔1分钟读1次，共读分钟，并计算平均每分钟吸光度变化率ΔA/min。 [校准和质控] 使用本公司提供的校准品校准，校准周期为30天，更换试剂批号时需要重新校准。建议使用正常值和病理值生化质控血清进行室内质控，测定的控制值应在确定的限制范围内，若控制值失控，实验室应采取适当的纠正措施。 [结果计算] 样本中ALT活性（U/L）= 式中：TV 总反应体积(ml) SV 样品体积(ml) 　( NADH在340nm处的毫摩尔分子消光系数为6.22 　P 比色杯光径(cm) ΔAU/min 样品管平均每分钟的吸光度 ΔAB/min 空白管平均每分钟的吸光度 [注意事项] 1、试剂和样品可因仪器要求不同，按比例增减，计算公式不变。 2、试剂请放2-80C储存，避免冷冻、污染，否则将导致失效 3、高脂或黄疸样本在340nm处有较高的吸收值。在这些样本的 测定中，高活性的丙氨酸氨基转移酶虽然可能将底物耗尽，但在 340nm处仍有较高吸收值，此时样本应稀释后再测试。 [参考值] 男性 女性 37 40U/L 28U/L 30℃ 29U/L 20U/L 仅供参考，建议各实验室对此予以确认或建立所服务人群的参考值。 [试剂性能] 下面结果是用本试剂在自动生化分析仪上测试获得的。 精密度：批内：CV≤5% 批间：批间相对偏差（R）应10％。 准确度：±10%范围内 线性范围：试剂盒测定的线性范围为～00U/L，线性回归的相关系数r0.990。如将试剂量与样品量改变，线性也随之改变。在自动分析仪上的线性取决于所用试剂量与样品量的比例、测定时间和比色杯光径。在以下条件时，对实验结果无干扰：抗坏血酸mg/dl 胆红素mg/dl 血红蛋白mg/dl 甘油三酯mg/dl [参考文献] 1. Clin. Chem. Acta 105 (1980) S. 147 - 172. 2. Synopsis der Leberkrankheiten: H. Wallh?fer, E. Schmid u. F. W. Schmidt, G. Thieme Verlag, Stuttgart 1974. 3. Thefeld W. et