原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白去除效果的研究论文.docVIP

　　原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白去除效果的研究论文 .freelL 100 g/L TCA；0.5 g婴儿配方奶粉A和B分别需5 mL 10 g/L 及20 g/L TCA；2 g酸奶则需3 mL 20 g/L TCA才能将蛋白完全沉淀。为原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶等乳制品的样品前处理提供了有价值的参考。 【关键词】 乳制品; 婴儿配方奶粉; 酸奶; 蛋白质; 毛细管电泳 Abstract On the basis of the development of a neethod for the analysis of α-lactalbumin(α-Lac)，β-lactoglobulin A(β-LgA) and β-lactoglobulin B(β-LgB)，different concentrations of acetic acid (HAc) and trichloroacetic acid (TCA) for the removal of proteins in railk，infant formula A and B，and yogurt inating of proteins in the above four samples.The proteins in 2 g of railk could be eliminated by 3 mL of 100 g/L TCA.0.5 g of infant formula A and B needs 5 mL of 10 g/L and 20 g/L TCA to remove the proteins.freelL of 20 g/L TCA is enough.The present research may provide valuable information for protein-containing sample(such as railk，infant formula and yogurt) pretreatment. Keyilk; Infant formula; Yogurt; Protein; Capillary electrophoresis 1 引言 色谱法分析原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶等乳制品中有益或有害化学成分时，必须除去其中的蛋白以得到准确结果，因为蛋白很容易在色谱柱上产生不可逆吸附，导致柱效下降。牛奶蛋白主要由酪蛋白和乳清蛋白组成，其中酪蛋白约占总蛋白的80%，乳清蛋白约占15%。乳清蛋白是酪蛋白沉淀后上清液中含有的蛋白〖1〗  饕瑟联乳白蛋白(α-Lac)、β-乳球蛋白(β-Lg)、免疫球蛋白G (IgG)和牛血清白蛋白(BSA)组成。其中α-Lac约占乳清蛋白的3%， β-Lg约占9%，IgG约占2%，BSA约占1%，其它为非蛋白氮(NPN)〖2〗糜昧磕芊窠鲜种样品中的蛋白去除干净，需分析蛋白沉淀后的样品上清液中是否仍有蛋白残留。因此，有必要建立能够准确测定乳清蛋白中含量较高的α-Lac， β-LgA及β-LgB的方法，以监测去除蛋白前后3种蛋白含量的变化，获知蛋白的去除效果。 毛细管电泳（CE）法因其非常适合蛋白分析而成为首选方法。常用的CE法一般利用涂层管或裸管，通过往分离缓冲液中添加高分子聚合物以实现蛋白分离〖5，6〗薅渴荨１狙芯拷⒘薈E同时分离并测定α-Lac， β-LgA及β-LgB的方法，考察了HAc和TCA对原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白的去除效果。 ２ 实验部分 2.1 仪器与试剂 Beckman P/ACE 5000型毛细管电泳仪（美国Beckman公司），配备紫外检测器；P/ACE工作站；F-33 pH/mV型酸度计（北京屹源电子仪器科技公司）；Universal 32型离心机（德国Hettich公司）；Millipore Milli-Elix/RiOs型超纯水器（美国Millipore公司）；旋涡混合器（法国Gilson公司）。 硼酸（优级纯，铁岭地区开源化工厂）；CsOH·H2O（99.5%，北京百灵威化学技术有限公司）；冰乙酸(99%)和NaOH（北京化学试剂公司）；羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD，分子量：1540 g/mol)，聚氧化乙烯(PEO，分子量：4000 kg/mol)， α-Lac， β-LgA及β-LgB（Sigma-Aldrich公司）。原料奶采自当地奶牛场，婴儿配方奶粉及大果粒酸奶购于当地超市。 2 g/L PEO储备液：称取0.2 g PEO于100 mL试剂瓶中， 加入100 mL水后于50 ℃水浴中加热直至溶解，摇匀后于室温放置备用。 α-Lac， β-LgA及β-LgB储备液：准确称取10 mg α-Lac，10 m