四色流式细胞术分析骨髓增生异常综合征原始细胞免疫表型论文.docVIP

　　四色流式细胞术分析骨髓增生异常综合征原始细胞免疫表型论文 .freeletric Immunophenotypic Features of Blasts in Myelodysplastic Syndromes AbstractThis study ed at exploring the immunophenotypic features of blasts in patients yelodysplastic syndromes (MDS). Four-color floetry using conventional and secondary gating strategies munophenotype blasts and the CD34 positive cells in bone marro RA/RAS，RAEB to RAEB-T，the proportion of CD34+ cells 8.0%，46.4% to 76.8% (P 0.05)；(2) using CD45 vs SSC gating strategy，ation of RA/RAS，RAEB to RAEB-T，the expression of HLA-DR，CD13，CD33，CD117 ethod than those by conventional gating (P 0.05). Hoentioned antigens on CD34+ cells among different MDS subtypes. It is concluded that conventional gating method can reflect MDS progression from RA/RAS，RAEB to RAEB-T，and secondary gating strategy may accurately reflect the biological features of blasts in MDS. Abnormal expression of CD34 is related to the immaturity level and heterogeneity of blast cells，orphology and cytogeics. Key yelodysplastic syndrome；immunophenotype；four-color floetry；CD34+ cell 骨髓增生异常综合征（MDS）是一组起源于造血干/祖细胞的恶性克隆性疾病，以外周血一系或多系细胞减少，骨髓一系或多系病态造血和高风险进展成急性髓细胞白血病为特征。我们应用一组单克隆抗体、四色六参数流式细胞术和常规和/或二次设门策略提取原始细胞、CD34阳性（CD34+）细胞，对其进行了免疫表型分析，以期为临床提供合理的诊断和治疗依据。 材料和方法 病例选择 29例MDS患者，男17例，女12例，年龄20-71岁，其中RA/RAS 17例、RAEB 6例和RAEB-T 6例。MDS的诊断参照《血液病诊断与疗效标准》（张之南，第2版）。 材料 单克隆抗体包括HLA-DR-FITC、CD15-FITC、CD2-FITC、CD10-FITC、CD20-FITC、CD33-PE、CD13-PE、CD7-PE、CD19-PE、CD117-PE、CD34-ECD和CD45-PY5等及其相应的标记荧光素的同型对照，所有单克隆抗体均为法国Immunotech公司产品。流式细胞仪为Beckman-Coulter公司的Epics XL 型，采用Expo32-ADC分析软件。 骨髓原始细胞的表达 对29例MDS患者同时进行了形态学及免疫分型检测，其中26例(89.7%)形态学诊断为MDS，此26例骨髓原始细胞在形态学上和流式细胞术上所占百分比见表1，两者无统计学差异（P 0.05）。余3例（10.3%）形态学无法诊断的患者免疫分型均提示为RA/RAS。Table 1. Correlation betetry and morphology in 26 cases（略） 流式细胞术检测 新鲜抽取的肝素抗凝骨髓（6小时内），调整细胞数至（0.5-1）×106/ml，分6管标记抗体后，行流式细胞术分析测定。6管抗体组合分别为CD15/CD33/CD34/CD45、HLA-DR/CD13/CD34/CD45、CD2/CD7/CD34/CD45、CD10/CD19/CD34/CD45、CD20/CD117/CD34/CD45及阴性对照管IgG1-FITC/IgG1-PE/IgG1-ECD/CD45-PC5。 常规的分析方法 在CD45 vs SSC散点图上，