半夏生品及不同炮制品中多糖的含量分析论文.docVIP

　　半夏生品及不同炮制品中多糖的含量分析论文 杨武德，李晶晶，李伟，王建科 【摘要】 目的探讨和分析不同炮制方法对半夏中多糖含量的影响。方法硫酸-苯酚显色后用分光光度计测定吸光度，（测定波长491nm）。按照回归方程计算含量。结果半夏生品及其六种炮制品中多糖的含量顺序为：法半夏（石灰甘草制） 姜半夏（姜矾煮制） 清半夏（矾煮） 清半夏（矾泡） 生半夏 贵州法半夏 姜半夏（姜炒）。结论不同炮制方法对半夏中多糖的含量有显著影响（P 0.05,P 0.01或P 0.001）。 【关键词】 半夏； 炮制品； 多糖 半夏为天南星科植物半夏Pinellia ternate (Thunb.) Breit.的干燥块茎。它具有镇咳、镇吐、抗早孕、保护胃黏膜［1］等多重功效，是临床上常用的镇咳祛痰药。半夏多糖对小鼠肉瘤(S180)、小鼠肝癌(H22)、小鼠艾氏腹水瘤(EAC)有抑制作用；半夏多糖可诱导人神经母瘤细胞(SH．SY5Y )、鼠肾上腺嗜铬细胞(PC12)凋亡、对鼠肾上腺嗜铬细胞(PC12)有抑制生长及增殖作用,即半夏中的多糖成分具有抗肿瘤作用［2］，当前肿瘤的发病率很高，传统的化疗和放疗治疗手段会导致强烈恶心、呕吐.freelg置于250 ml的容量瓶中,加蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀备用。再精密量取6.0 ml定容到100 ml的容量瓶中摇匀制成0.060 2 mg/ml的对照品溶液。 2.2 苯酚溶液的配制称取苯酚150 g，镁片0.3 g，碳酸氢钠0.3 g，置于圆底烧瓶中，再整个放入沙锅内蒸馏，收集182℃馏分，称取20 g加水稀释至400 ml置于棕色瓶中，避光保存。 2.3 标准曲线的绘制精密吸取葡萄糖对照品溶液0.2 ，0.5，0.8，1.1，1.4，1.7 ml置于10 ml的比色管中，体积不足2.0 ml的用蒸馏水补足，分别精密加入5%的苯酚溶液1.0 ml，浓硫酸5 ml摇匀，放置5 min，再置于沸水浴中15 min，取出置冷水浴中放置5 min，取出，以蒸馏水为空白，于491 nm波长处测定吸光度。以浓度(mg/ml)为横坐标，吸光度(Abs)为纵坐标绘制标准曲线。回归方程为A=52.092C-0.025 3，r=0.999 4；结果表明葡萄糖在0.001 506～0.012 801 mg/ml的范围内含量与吸光度有良好的线性关系。 2.4 换算因子的测定 2.4.1 半夏多糖的提取与精制精密称取以干燥的半夏粉末24.703 2 g，置于150 ml索式提取器中加入石油醚(60～90℃)的回流提取4 h，弃提取液(脱脂)。药粉挥干溶媒后，加入8倍量80%的乙醇水浴回流提取3次(4，3，2 h)以除净单糖，低聚糖及醇溶性杂质。药粉挥干溶媒，置于圆底烧瓶中100℃水浴提取3次(3，2，1 h)，合并药液，浓缩，用少量蒸馏水稀释后再用Sevage(正丁醇∶氯仿=4∶1)脱蛋白，离心（3 000 r/min）15 min ，得液，流水透析24 h，加入无水乙醇使乙醇含量达到80%，在冰箱中（4℃）放置24 h，离心得多糖；再分别用丙酮、氯仿及无水乙醇依次反复冲洗多次，60℃干燥至恒重，得精制多糖粉末备用。 2.4.2 换算因子的测定精密称取60℃干燥至恒重的半夏精制多糖粉末30.00 mg，置于100 ml的容量瓶中，溶解，摇匀，加蒸馏水稀释至刻度再摇匀。分别精密吸取5份，每份0.3 ml置于10 ml的具塞比色管中，加蒸馏水至2 ml，按标准曲线项下操作测定吸光度，平均换算因子为f=1.207，RSD=3.45%（n=5）。公式为：换算因子f= g)；C为样品中葡萄糖浓度(μg/ml)；D为稀释因素。 2.5 多糖的测定 2.5.1 多糖供试品溶液的制备半夏生品及各种炮制品经60℃烘干，粉碎，过40目筛，再在60℃烘干至恒重，取干燥粉末约0.8 g精密称定，按“2.4.1”项下操作进行脱脂、色素，除去单糖，低聚糖、醇溶性杂质；100℃水浴提取多糖，合并多糖提取液，定容到250 ml即得。 2.5.2 重现性实验取生品6份，每份约0.80 g，精密称定，按多糖供试品的制备方法制备供试液，分别精密吸取0.2 ml，放到10 ml的具塞比色管中，按照标准曲线项下操作，测吸光度；结果： RSD=1.5%，表明该仪器的重现性良好。 2.5.3 精密度实验分别精密吸取生品供试液0.2 ml。按标准曲线下操作测得吸光度分别如下：A1=0.353，A2=0.358，A3=0.362，A4=0.359，A5=0.360，A6=0.361。结果RSD=0.89%(n=6)。精密度符合要求。 2.5.4 稳定性实验取生品供试液0.2 ml按照标准曲线项下操作每30 min 测1次吸光度，3 h内的测定结果如下：