组胺酸脱羧酶基因敲除小鼠学习记忆和海马CA1区突触可塑性的改变.pdf

浙扛太季博士季位论文——冀要 组胺作为神经系统的递质或调质，在许多中枢活动中起着重要的调节作用， 如神经内分泌调节、饮水摄食调节、体温调节、觉醒一睡眠，运动，攻击行为以 及学习记忆等。学习记忆是脑的高级功能，在许多发病率较高的中枢神经系统疾 病中，病人的学习记忆功能均受到不同程度的损害。因此，组胺与学习记忆的关 系成为越来越多的研究者致力的热点问题。但随着研究的深入。人们发现组胺系 统对学习记忆的影响十分复杂，对组胺以及组胺系统的相关药物在行为学方面的 研究均出现不一致的结果。其中较为重要的原因是，组胺系统的药理学工具特异 性相对较低，并没有选择性的、能够显著持久的抑制脑内组胺合成，及同时拮抗 所有组胺受体的工具药。因此，越来越多的研究者采用HDC基因敲除(HDC-KO) 小鼠来探讨组胺长期缺乏后对学习记忆的影响。研究表明，HDGK0小鼠对物体的 辨别记忆能力较其野生型(wild type，WT)小鼠下降，而在水迷宫和被动回避反应 的学习记忆能力增强，并认为其与多巴胺的负性增强有关。但是这种假设需要在 其它学习记忆模型中进一步证明，同时这些研究均停留在行为学水平，没有探讨 其增强效应的深入机制。由于背景和空间学习记忆与海马结构的突触可塑性密切 相关，在组胺的长期缺乏的情况下是否影响HDC-KOd、鼠的海马的突触可塑性，而 且在学习记忆的行为学任务中，这种突触可塑性是否发生改变，如何改变，至今 仍不清楚． 因此为了进一步研究组胺长期缺乏对学习记忆的影响及其深入机制，本研究 采用海马依赖的背景恐惧记忆模型，观察HDC-KO小鼠的学习记忆改变；同时用细 胞外电生理记录HDC-KOtb鼠突触可塑性的改变，探讨行为学改变的生理机制。 浙江大季博士晕位论文——奠姜 第一部分HDC基因敲除小鼠背景恐惧记忆的改变 fear 近年来，恐惧条件反射模型(Pavlovian conditioning)逐渐成为研究学习 fear 记忆神经生物学机制的主要行为学模型，分为背景恐惧条件反射(cntextual fear conditioning)和线索恐惧条件反射(cuedconditioning)．在这个模型中，小 stimulus)和足底电刺激 鼠需要在训练中将仪器背景刺激及声音刺激(conditioned (unconditionedstimulus)联系起来，产生对背景或声音的恐惧记忆，当小鼠再次 暴露到相同背景或者在不同背景中的声音刺激时，小鼠会表现出呆滞反应 (freezing)，其持续时间的长短是衡量恐惧记忆能力的标志。背景恐惧记忆而不 是线索恐惧记忆依赖于海马。为了进一步研究组胺长期缺乏在海马依赖的学习记 忆的重要作用，我们采用背景恐惧条件反射模型．观察HDC．KOd鼠的学习记忆是 内组胺含量极低。免疫印记发现HDC．K04,鼠海马细胞膜H2受体上调。行为学结 升高，至训练后ld有显著性升高，并且一直持续到训练后14d。这些结果提示 HDC-KOtJ*鼠对背景恐惧记忆较WT4,鼠显著增强，其时程的改变提示组胺长期缺 乏可能参与海马的获得和巩固．我们进一步在训练前、训练后以及测试前脑室内 注射组胺来确定背景恐惧记忆的增强，同时探讨组胺的缺乏将影响获得、巩固和 再现中的哪个过程。结果发现，在训练前、训练后注射组胺明显降低HDC-KO／J,鼠 呆滞反应的时间百分率，在测试前注射没有影响，证明组胺长期缺乏可能影响了 海马的获得和巩固过程，对再现过程没有影响。对线索恐惧记忆的结果表明， HDC—KOd,鼠在未受电击的环境中受到声音刺激时，其呆滞反应时间也延长，提示 组胺长期缺乏导致的学习记忆增强对海马的依赖可能不是特异性的。 4 新讧大辱博士季位论文——蕾要 第二部分HDC基因敲除小鼠的突触可塑性改变