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蜡梅蛋白酶抑制剂基因CpKTI功能初步分析论文
I II II II l，
篡曼曼鼍鼍鼍皇鼍鼍量毫宣＼w：’■QXj
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一I 目录
摘要……………………………………………………………………………………………………………………………………．I
ABSTRACT………………………………………………………………………………………………………………………III
l文献综述…………………………………………………………………………………………．．1
1．2蛋白酶抑制剂的分布及分类…………………………………………………………………．1
1．3蛋白酶抑制剂的作用机理……………………………………………………………………．2
1．4蛋白酶抑制剂的应用进展……………………………………………………………………。2
1．4．1蛋白酶抑制剂抗虫基因工程应用进展…………………………………………………．2
1．4．2在大肠杆菌中表达的产物的应用………………………………………………………．3
1．4．3在临床医学方面…………………………………………………………………………．3
1．4．4作为饲料方面……………………………………………………………………………4
1．5蛋白酶抑制剂的表达调控……………………………………………………………………4
1．5．1植物蛋白酶抑制剂抗虫转基因工程表达调控存在的问题……………………………．4
1．5．2植物蛋白酶抑制剂抗虫转基因工程表达调控的对策分析……………………………．6
2弓I言………………………………………………………………………………………………………………………………．1l
2．1研究背景及意义…．．．…………………………………………………………………………11
2．2技术路线………………………………………………………………………………………．13
3蜡梅CpKTI的克隆与分子特性………………………………………………………………．．15
3．1技术路线………………………………………………………………………………………15
3．2实验材料……………………………………………………………………………………．．15
3．2．1蜡梅花cDNA文库……………………………………………………………………。l5
3．2．2菌株与载体………………………………………………………………………………l5
3．2．3主要生化试剂及仪器设备………………………………………………………………15
3．2．4试验常用溶剂配方………………………………………………………………………16
3．2．5基本培养基配方…………………………………………………………………………l6
3．3实验方法……………………………………………………………………………………．17
3．3．1
EST序列特征分析………………………………………………………………………17
7
3．3．2蜡梅CpKTl基因的eDNA获得………………………………………………………。1
两南大学硕十学位论文
3．3．3
CpKTI基因cDNA生物信息学分析……………………………………………………20
3．4结果与分析…………………………………………………………………………………．20
3．4．1蜡梅CpKTI基因全长的获得与cDNA序列结构特征…………………………………20
3．4．2
CplCTI基因编码蛋白信息学分析………………………………………………………2l
3．5讨论………………………………………………………………………………………………………………………一28
4植物表达载体构建与转基因烟草的获得和分析………………………………………………．29
4．1技术路线………………………………………………………………………………………29
4．2实验材料………………………………………………………………………………………29
4．2．1植物材料………………………
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