饮水型慢性氟中毒致脑损伤分子机理的研究.pdfVIP

Studiesonth Zi-guiZhang By Zhu Wen-ring Normal iang University Zhej Jinhua，Zhej， 一 iang，China 一， May,2010 饮水型慢性氟中毒致脑损伤分子机理的研究 摘要 氟虽是人体必需的微量元素之一，f日．长期过量摄入会引起慢性氟中毒 (Chonic fluorosis)。氟对中枢神经系统的毒性表现为影响儿童智力发育，抑制白 发性神经活动，损害学习记忆能力等。海马是与学刊址忆密切联系的关键脑区， 也是氟神经毒作用的靶部位之一。已有研究证明，过量氟会损伤海马内的突触超 微结构，但鲜见氟影响突触相关蛋白表达的报道。突触后致密物蛋白95(post synapticdensity95，PSD一95)足突触后致密物的主要蛋白之一，本身并无活性， 的重要蛋白。PSD一95LIJ．以通过不州的结构域串集NMDA受体其相关分子，形成 信号复合物，在突触水甲转导并整合兴奋性信号。台：突触呵颦性过程中，NMDA 受体起着极为关键的作用。我们推测，PSD．95表达水jF的／叟化可能会影响NMDA 受体的簇集，进而影响动物的学习记忆能力。 白山基损伤学说被公认为氟中毒发病机制之一。该学说认为，正常情况下机 dismutase，SOD)a】：11抗氧化 体内山十各种抗氧化酶(如超氧化物歧化酶superoxide 物质(如维生素C)的存在，自由基的J托生和清除处于动念甲衡状态。氟中毒发，L 时，体内脂质过氰化作用增强，氧化系统与抗氧化系统的平衡遭到破坏，从而导 前检测脂质过氧化水平的常用指标，但由于受多种凶素影响，特异性与敏感性不 强。冈此，本实验通过复制慢性氟中毒动物模犁，宏观卜观察慢性氟中毒对大鼠 脑功能的影响，微观上选用特异性与敏感性较好的自旋标记法检测脑内氧化应激 水平，并采用免疫组化法(immuno．histochemicalstain，IHC)检测海马CA3区PSD ．95蛋白的表达水平。通过研究，拟筛选出脑内学习记忆相关脑区(海马)氟中毒 相关蛋白和因子(靶分予)，为深入探讨氟对中枢神经系统毒性作用的分子生物学 摘要 机制提供一定的理论基础，为氟中毒的早期诊断和早期治疗提供科学依据，从而 拓宽为我省氟污染区饮水型地氟病患者制定合理的综合治疗方案的思路。 研究方法：192只初断乳的雄性SD大鼠随机分为四组，即对照组(饮用自来水， 30mg／L)，高氟组(饮水含NaF60mg／L)。各组以配制的溶液作为饮水唯一来源， 自由摄食、饮水，饲养时间为18个月。实验中傅三个月对动物进行行为检测，以 开场行为检测大鼠的自发活动和探究行为，以水迷宫检测人鼠的空问学爿记忆能 力；分别在染氟中期(9个月)和染氟结束后(18个月)分两批断头处死大鼠，HE染色 作海马CA3区病理学观察，自旋标址法检测突触体膜流动性的变化，免疫组化法 检测海马CA3区PSD．95蛋白表达的改变。 实验结果： 1、开场行为结果显示，慢性氟中毒呵抑制大鼠在新异环境中的A发活动， o水迷宫结果显示， 使跑动格数减少(p0．05)，站立频率降低(pO．05或p0．01 各染氟组大鼠搜索平台潜伏期、搜索平台总路程普遍高于对照组，说明慢性氟中 毒大鼠空IⅥ学习记忆能力下