同位素标记相对与绝对定量技术研究进展.pdfVIP

中国生物工程杂志 　Ch ina B iotechno logy, 2006, 26 ( 10) : 83 ～87 同位素标记相对和绝对定量技术研究进展 罗治文 　朱 　　　谢谓芬 (第二军医大学附属长征医院消化科 　上海 　200003) 摘要 　定量蛋白质组学是蛋白质研究的前沿学科 , 目前常用的定量蛋白质组学研究技术有荧光 ( ) ( ) ( ) 差异凝胶电泳 D IGE 、同位素亲和标记 ICA T 等 。同位素标记相对和绝对定量 iTRAQ 技术是 近年来最新开发的一种新的蛋白质组学定量研究技术 。结合非凝胶串联质谱技术 ,该技术可对 复杂样本 、细胞器 、细胞裂解液等样本进行相对和绝对定量研究 ,具有较好的定量效果 、较高的重 复性 ,并可对多达四种不同样本同时进行定量分析 。对 iTRAQ 技术的原理 、实验方法及应用进展 进行了综述 。 关键词 　定量蛋白质组学 　iTRAQ　D IGE　ICA T 中图分类号 　Q 816 ) 　　蛋白质组学概念的提出 ,为蛋白质研究提供了全 sp ectrom eter, LCM S/M S 联用技术定量和鉴定蛋白质 。 新的思路 。随着蛋白质组学研究的深入发展 , 人们 已 [ 5 ] ( 最早由 Gygi等 提出的同位素亲和标记 isotop ecoded 经不再满足于对于一个细胞或组织的蛋白质进行定性 ) affin ity tags, ICA T 技术 ,其最大的缺点是蛋白质序列中 研究 ,而是着眼于蛋白质量的研究 。近年来 ,有学者提 必须含有半胱氨酸 ,那些在功能上有重要作用但不含 出了定量蛋白质组学的概念 , 定量蛋白质组学就是把 半胱氨酸的蛋白质将会被遗失 。 一个基因组表达的全部蛋白质或一个复杂的混合体系 　　近 年 来 , 由美 国应 用 生 物 系 统 公 司 ( App lied ) 中所有的蛋白质进行精确的定量和鉴定 。蛋白质定量 B io system s Incorporation , AB I 开发的同位素标记相对 研究分为绝对定量和相对定量两种 ,但是 ,对低丰度蛋 和 绝 对 定 量 ( isobaric tags for relative and ab solu te 白质检测的绝对定量研究技术难度很高 , 目前蛋 白质 quantitation , iTRAQ )技术是一种新的、功能强大的可同 组学定量研究主要集中在对蛋白质表达差异或者表达 时对四种样 品进行绝对和相对定量研究的方法 [ 6 ] 。 量的变化进行比较研究的相对定量蛋白质组学研究 。 iTRAQ 试剂为可与氨基酸 N 端及赖氨酸侧链连接的胺 对复杂体系中的蛋 白质进行相对定量主要有两种方 标记 同重 元 素 ( isobaric ) 。在 质 谱 图 中, 任