3130XL 简明使用手册.pdfVIP

AppliedBiosystems 3130 简明使用手册 AppliedBiosystems 3130/3130XL 简明使用手册 DATA COLLECTION V3.0 美国应用生物系统公司中国公司 第 1 页 共 32 页 AppliedBiosystems 3130 简明使用手册 仪器准备 P7 是 需要空间定位？ 进行空间定位 P11 否 是 需要光谱校正？ 进行光谱校正 P12 否 是 运行测序样品？ 编制测序样品板文件 P20 否 运行片断 是 编制片断分析样品板文件 P27 分析样品？ 上机运行 P29 结果分析，参考相关手册 第 2 页 共 32 页 AppliedBiosystems 3130 简明使用手册 一．DNA 测序或片段分析的流程： 1.样品制备： 样品制备即是在DNA片断上用化学的方 法标记荧光素。 标记上荧光素后就可以 对DNA片断进行检测和确认了，一般每一 DNA分子标记一个荧光素分子，最多有五 种荧光素可用于DNA样品的标记。 不同 的样品制备方法选用不同的荧光素和试 剂的组合，样品制备可在96孔或384孔板 进行 2.软件设置： 操作人员根据所使用的标记方法、电泳的毛细管长度、电泳胶的种类等，在数据采集(Data Collection)软件中选择正确的运行模块和分析模块。 3.开始运行： 操作人员把样品板放到仪器上并开始运行，仪器便会根据设定好的顺序，用相应的电泳程 序分析样品板上的样品。 4.电泳： 用“电进样”的方法将带电的样品分子加 到灌好电泳胶的毛细管的进样端（负极）， 然后在毛细管两端加上直流电压，样品中 不同大小的DNA片段开始从负极向正极移 动， 移动的速度受到片段自身大小影响， 片断越短移动得越快。电泳的结果是使长 度不同的 带电 DNA 片断互相分离，并且 按片段的长短的顺序通过检测窗口，产生 信号，短片段先到达检测窗口。 5.激发和检测： 当标记有荧光素的DNA片断移动到检测窗口时，荧光素受到激光束的激发而产生荧光信号， 此荧光信号被CCD检测器所检测并被转化为电信号传递到计算机。 第 3 页 共 32 页