蛋白质-培训课件.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * 第一向电泳：等电聚焦电泳 聚焦后凝胶放置在SDS凝胶上，进行第二向电泳 第二向电泳：SDS分子量大 分子量小 pH9 pH3 pH9 pH3 大肠杆菌全蛋白提取液双向电泳凝胶染色后照片 利用离子交换基质上的可解离活性基团对各种蛋白结合力不同而达到分离目的的一种分离方法 常用的支持基质：纤维素，琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶、树脂 ——CH2COO- H+ ——DEAE+ Cl- 活性基团： 阳离子：羧甲基（CM） 阴离子：二乙基氨基乙基（DEAE） 由于蛋白质分子具有两性性质，所以可用阳离子交换剂，也可用阴离子交换剂进行蛋白的分离纯化。 离子交换层析 阴离子交换层析分离蛋白质 阳离子交换层析原理 洗脱方法：改变盐浓度和改变pH的方法 亲和层析(affinity chromatography) 利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力，使生物分子分离纯化的技术。这种分离纯化方法专一性强，理论上可以从复杂的体系中一步提取所需的物质。 免疫亲和层析：抗原—抗体 凝集素亲和层析：糖—凝集素 金属螯和层析：如NTA-Ni—poly-His 根据配基特异性的分离纯化方法 氨基酸、多肽、蛋白质类生物药物 (一)氨基酸及其衍生物 1.AA营养价值及其与疾病治疗关系 ①八种必需氨基酸： 是人体必需从食物中获取的营养物