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放线菌和真菌形态的观察重点讲义
放线菌和真菌形态的观察 放线菌和真菌形态的观察 目的要求 实验材料 实验程序 思考题 目的要求 学习观察放线菌和真菌形态的基本方法 加深理解放线菌和真菌的形态特征 实验材料 放线菌和真菌培养物 1. 放线菌培养物:青色链霉菌(Streptomyces glaucus)或“5406”产生菌(St. microflacus)四天培养物。 2. 啤酒酵母(Saccharomyces cervisiae)24至28h液体培养物或斜面培养物。 3. 黄曲霉(Aspergillus flavus)4d平面培养物。 4. 各种真菌示范片。 显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒精灯、镊子等。 乳酚油、碘液、酒精、蒸馏水等。 实验程序Ⅰ 观察放线菌链霉菌的形态 观察酵母菌的形态 观察霉菌的形态 看录象 实验程序Ⅱ(观察放线菌链霉菌的形态) 个体形态直接观察法: 观察菌丝和孢子丝自然生长的性状,其中包括气生菌丝(较粗),基内菌丝(较细)和孢子丝的形状,如分枝状况及孢子丝的卷曲等,并绘图说明。 印片染色法: 印片 微热固定 石炭酸复红染色1min 水洗 晾干 镜检。(示范片) 实验程序Ⅲ(观察放线菌链霉菌的形态) 插片染色法: 280C插片培养4—6d,轻轻取出盖玻片,进行固定、染色、水洗、晾干、镜检。观察方法同“直接观察法”,观察基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的卷曲状况,及分生孢子的形状,绘图加以说明(本实验采用青色链霉菌接种后观察)。 实验程序Ⅳ(观察酵母菌的形态) 观察酵母菌形态和无性繁殖: 用高倍镜观察啤酒酵母的形态和出芽繁殖。 酵母肝糖染色法: 在洁净的载玻片上滴一小滴路哥氏碘液(Lugol),取一环酵母菌液与碘液混匀,盖上盖玻片,镜检,菌体呈淡黄色,肝糖粒呈红褐色。在高倍镜下观察菌体形态、出芽、芽簇、肝糖粒,并绘图。 酵母脂肪粒染色法: 在洁净的载玻片上加一滴,取一环啤酒酵母与福尔马林混匀,静止5min,加1滴美兰染色液,10min后再加一滴苏丹Ⅲ染色液,盖上盖玻片,镜检。原生质呈兰色,脂肪粒呈粉红色,而液泡无色。(示范片) 实验程序Ⅴ(观察霉菌的形态) 观察黄曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况(着重辨认分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子):在洁净载玻片中央加一滴酒精,用接剖针挑取黄曲霉培养物少许放入其中,再加入酒精和蒸馏水各一滴(重复一次),使分生孢子分散,便于观察。倾去酒精和蒸馏水,加一滴乳酚油(防止细胞变形和气泡产生,又可防止干燥以保持较长时间),盖上盖玻片,镜检、观察、绘图。 用同样方法制取青霉(Penicillium sp.)封片,示范片,观察菌丝有无分隔和分生孢子梗、小梗、及分生孢子排列方式,并绘图。 用同样方法制取镰刀霉(Fusarium sp.)封片,示范片,观察孢子丝和着生部位的构造,并绘图。 实验程序Ⅵ(观察霉菌的形态) 取黑曲霉(Rhizopus niger)5d平板培养物,用其皿盖,在低倍镜下观察菌丝体形态(假根、匍匐菌丝、孢囊梗及孢囊等)并绘图。 更好的是采用载片培养法,可制成永久的封片,更便于保存。 做蘑菇切片。观察担子菌担子着生情况及其孢子的形态等,示范片,并绘图。 观察梨头霉(Absidia sp.)或根霉的接合孢子,示范片,并绘图。 看录象 真菌的有性孢子和无性孢子及其结构 实验室平菇的栽培 思
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