不同基因型马铃薯的花药培养.pdfVIP

维普资讯 中国马铃薯，第22卷，第3期，2008 中图分类号：$532 文献标识码：A 文章编号：1672—3635(2008)03—0140—04 不 同基 因型马铃薯 的花药培养 李凤云，盛万民，田国奎，李庆全，王立春，徐潍岩 (黑龙江省农业科学院马铃薯研究所，黑龙江 克山 161606) 摘 要：马铃薯花药培养在马铃薯育种实践中具有重要的意义。现以杂交圃中77份亲本材料为试验材料，对花 药高温前处理、培养基和基因型等因素进行了试验。结果表明：马铃薯花药培养对基因型有很大依赖性，不同基因型 马铃薯愈伤诱导率范围是0．16％～9．50％，胚状体发生率范围是0-31％～15．63％。克97G8-4、讷 16和白俄 3的植株再生 率范围为 12．00％~23．08％，其余全部没有分化出植株。倍性鉴定表明：双单倍体的发生率为93．75％。诱导培养基以 MS+0．5mgL‘-NAA+I．0mg‘2，4-D+I．0mg‘KT+0．5％活性炭+100mgL‘-A‘gNO3，即⑧号效果最好，植株分化培养基 以Ms+4．0mg·L-G‘A3+2．0mg·L-ZT+30mg·l『蔗糖+0．7％琼脂，即②号效果较好。高温预处理对胚状体的发生有利。 关键词：马铃薯；花药培养；双单倍体 目前，马铃薯育种中存在着遗传基础狭窄和品 药培养体系，应用于育种实践。 种问亲缘关系近的问题，许多重要经济I生状难有突 l 材料与方法 破性进展 。马铃薯 74％的资源存在于二倍体野生 种和近缘栽培种中，四倍体与二倍体之间杂交不亲 1．1植物材料 合或杂交后代产生不育的三倍体，因此限制了野生 以黑龙江省农业科学院马铃薯研究所杂交圃 种中优 良基因在马铃薯育种中的利用。通过花药培 77份育种亲本材料为供试材料。 养产生的双单倍体可直接与野生种杂交，可将野生 1．2 试验方法 种中的高干物质、抗病性、抗虫性等优 良基因转移 1．2．1花药的采集和预处理 到普通栽培种中 【】，从而扩大遗传基础 ，提高育 选择处于单核靠边期的花药，花药的大小因材 种效率，缩短育种周期，因此，花药培养在马铃薯 料而异，一般在 3—5mm左右，呈淡绿色。将精选 育种实践中具有重要的意义。 的花蕾编号，放在4cC冰箱中冷藏2448h。 马铃薯花药培养在 20世纪 80年代 已经开始研 1．2．2 消毒接种 究 ，戴朝曦 5『l、朱 明凯等 、王蒂等 和冉毅东 将花蕾用 自来水冲洗 10min左右，在酒精中蘸 等 【】对马铃薯花药培养中的高温前处理、培养基 一 下 ，立即取出，用千分之一的升汞消毒 7 10 中植物生长调节剂的种类及浓度和硝酸银的作用等 min，无菌水冲洗 3—4遍，在超净_T作台内将花药 因素进行了研究和报道，但仍然存在诱导效率低和 取出，将完整无损的花药接种在 3种诱导培养基 分化成苗率低的问题，使花药培养至今仍很少应用 上，每个培养皿( 90mmX18mm)接种40枚花药。 于育种实践。本试验 以马铃薯育种中的亲本材料为 1．2_3培养基 研究对象进行花药培养，试图建立高效的马铃薯花 (1)诱导培养基 MS+2．0mg·L～NAA+I．5mg·L～2。4一D+1．0 收稿 日期：2007—11-10 mgL·～KT+0．5％活性炭+30mg·L～AgNO3。 基金项 目：黑龙江省农业科学院科