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170 2010年第 32卷第3期 中国麻业科学 PLANTFIBERSCIENCESINCHINA
文章编号：1673—7636(2010)03—0170—07
适于AFLP分析的大麻干叶DNA
快速提取方法研究
胡尊红 一，陈 璇 ，郭鸿彦 ，许艳萍 ，张庆滢 ，郭孟璧 ，伍菊仙 3，杨 明
(1．云南农业大学，昆明，650201；2．云南农业科学院经济作物研究所，昆明，650205；
3．云南工业大麻股份有限公司，昆明，650217)
摘 要：基因组DNA提取是分子生物学实验研究的一项基础技术。而高质量DNA是AFLP试
验成功的关键。本研究在传统 CTAB法的基础上进行4种处理来提取大麻干叶片基 因组 DNA。以
13一巯基 乙醇。PVP-40和抗坏血酸不同组合及浓度为因素进行 了试验。试验结果表明：在 4种处理
中，采用在提取液添加 2％13一巯基 乙醇 (州 )和 3％PVP一40(M／V)提取的DNA质量最高，无褐
化 ，紫外分光光度计测定其 OD260／OD280为 1．82．O，经酶切消化 ，AFLP—PCR扩增的带型清晰稳
定，重复性好，说明这种改进DNA提取方法适于大麻 AFLP分析。
关键词：大麻 ；干叶；基因组 DNA；AFLP
中图分类号：$563．3 文献标志码：A
A RapidM ethodforGenomicDNA Extractionfrom Dried
Hemp (CannabissativaL．)LeavesofrAFLPAnalysis
HUZun-hong一，CHENXuan，GUOHong-yan，XUYan-ping2，ZHANGQing-ying~，
GUOMeng-bi，WUJu-xian，YANGMing2．
(1．YunnanAgriculturalUniversity，Kunming，650201；
2．IndustrialCropResearchInstituteofYurmanAcademyofAgriculturalSciences，Kunming，650205；
3．YunnanIndustrialHempCo．Ltd，Kunming，650217)
Abstract：The extraction ofgenomic DNA iS a basic technology for molecularexperiment．
High-qualityDNAistheSuccesskeyofAFLPexperiment．Inhtisstudy，htegenomicDNAofdried—hemp
leavesWaSextractedbyfourDNA extractionmethodswithhtreefactorsindifferentcombinationand
differentconcentrationbasedonthetraditional CTABmethod．TheresultsshowedthatthemethodwithtIle
extractionadding2％B-mercaptoethanol(V，、，)and3％PVP-40(M／V)isthebestamongfourmehtods
andthevalueofOD260／OD280isin1．8—2．0byUVspectrophotometryphotometer．AfterthegenomicDNA
digestionandAFLP-PCR，thebandpatternsofAFLP-PCRma plificationproductsisclear，stableand
reproducible，SOhtemodifiedmethodforDNA extraction ofdried—hemp leavesissuitableforAFLP
naalysisofCannabiss 口L．
Keywords：hemp(CannabsisativaL．)；driedleaves；genomicDNA；AFLP
大麻(CannabsisativaL．)是大麻科(Cannabinance)大麻属 (Cannabbis)-
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