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分子标记辅助选育多抗番茄品系 摘要 本论文介绍了分子标记育种的研究近况本，实验利用复合杂交技术将含抗叶霉病（Cf-5）、枯萎病（I-1）、根结线虫（Mi-1）、番茄烟草花叶病毒（Tm-2）、番茄黄化曲叶病毒（Ty-2）、成熟抑制基因（rin）的亲本杂交，利用分子标记辅助选择和接种鉴定相结合的方法在杂交后代分离群体中选出具有四个抗性基因的植株，培育具有多抗性的亲本体系，为培育多抗性番茄优良品种做好基础工作。 关键词 番茄；分子标记；抗病性；聚合育种 番茄(Lycopersicon.esculentum Mill)是世界上重要的蔬菜作物之一，也是保护地内经济效益较高的蔬菜，它适应范围广，分布于世界各地，被列为全世界产量最高的30种农作物之一。品种多，产量高，具有丰富的营养，富含多种维生素以及多种矿质元素。此外，番茄中含有的番茄红素及胡萝卜素具有抗氧化功能，食用番茄可以预防衰老及癌症等，不仅作为果蔬食用，还可以作为重要的加工原料，有重要的经济价值。但是由于连年重茬种植，病害严重，病害种类已多达40多种(杜永臣，1999)，成为限制其产量和品质的一个重要因素，且造成大面积减产。因此如何提高番茄产量、改进品质、提高抗病性己成为番茄育种的重要课题。 1番茄主要病害及延熟突变研究概况 番茄由于营养丰富，香味浓郁，适应性强，较易于栽培，产量高，用途广，因而在世界各地被广泛种植，成为各国的主要蔬菜作物之一。但在生产的过程中，由于病虫害的危害，而造成大面积的减产，严重影响经济效益。 1.1番茄抗叶霉病育种研究进展 国外很早就有关于抗叶霉病育种研究报道。在加拿大、美国、荷兰、英国等温室番茄生产发展较早的国家，从20世纪30年代起就开始了番茄抗叶霉病育种的研究。据加拿大的Langford报道，在20世纪30年代初期，几乎所有的温室番茄品种都经过了对叶霉病抗性筛选。1942年美国的Cuba氏发表了第一个抗叶霉病品种Bay state。欧美国家早期培育的品种有Stirling Castle、Leaf Mould Resister、V473、V121、STEP390、Vagabond等。我国的番茄抗叶霉病育种起步较晚。自80年代，随着我国保护地番茄生产的迅速发展，叶霉病的发生日趋严重，引起了我国番茄育种工作者的重视(柴敏，张环等，1995)。1984年展开抗叶霉病育种研究，到1988年由北京农林科学院培育出了我国第一个抗叶霉病品种双抗2号(含Cf4基因)。杜永臣等利用从欧洲、日本等地引进的优良资源材料，经多代复合杂交育成适合保护地栽培的抗叶霉病品种，如中杂11号、中杂9号等。 1.2番茄抗枯萎病育种研究进展 番茄抗枯萎病育种研究开始比较早，在1905年美国就已经育成“迈球(Marghbe)”、“番里加(prichard)”等抗枯萎病品种，它们是多基因支配，具有水平抗性 (王全华，李景富，1996) 。1929 年，在秘鲁采集到的番茄属野生型亚种L. pinpinellifolium 的另一系统 P.I79522(Missori Accessioniho)上发现了单个显性抗病基因，后来定名为I基因，并用它育成世界上第一个垂直抗病性的抗枯萎病品种“全美洲”(pamAmerica)(Porte，1941)。Stall 和 Walter(1965)从番茄属一野生型亚种(F. Pim pinellifolium)和普通番茄(L. esculeritum)的种间杂交种 P.1126915中发现了抗病个体，将该基因定名为I-2，利用这个基因最早育成的抗病品种是 Walter 和 Flor-Dade(李发玲等，2010)。抗病基因 I-3 是来自秘鲁番茄的一个系统 P.1126944，美国研究者用它与栽培番茄杂交育成了稳定的品系 IRB301-30、IRB301-31(王全华，1996)。 1.3番茄抗病毒病育种研究进展 从20世纪60年代以来，国外积极开展了番茄抗病毒病育种研究，培育了一批优良的抗性品种。有效控制了病毒病的危害(山川邦夫，1983)。1975年，我国从美国引入了玛娜佩尔(Manapep)番茄，该番茄对TMV病毒可以产生过敏性抗性，并且常表现为广泛性的水平抗性。1979年西安市农科院郁和平等人，利用玛娜佩尔(Manapep)和优良的品种杂交，成功育成了性状良好的“矮黄TM-2nv”番茄品种(张汉卿等，1985)。 Ohrnori等(1996)利用220个随机引物对近等基因系进行筛选，找到了1个与Tm-1基因紧密连锁的RAPD标记，Motoyoshi(1996)利用近等基因系得到13个与Tm-2连锁的RAPD标记，标记OPEl6和OPN31与Tm-2连锁最为紧密。其中有6个标记与其的遗传距离在0.7cM之内，并成功的将其中的4个标记转化为SCAR标记。P