中华绒螯蟹卵巢与胚胎发育期脂类在卵黄物质中存在的形态及其变化.pdfVIP

中华绒螯蟹卵巢与胚胎发育期脂类在卵黄物质中存在的形态及其变化.pdf

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动物学杂志 ChineseJournalofZoology 199934(1) 态和变 化 l 材料和方法 在卵黄发生 的旺期 ,卵 中常可见到大量 的 1.1 实验用蟹 取于崇 明县前卫村 中华绒螯 囊泡 (v),这些囊泡可能是 内质网高度分化形成 蟹繁殖基地 。9月份蟹平均重 57g,性腺指数在 的,泡 内含物是卵黄体合成的区域,可见不同发 2.8~3.6。1‘2月成熟蟹重 50~150g不等,性 生程度的卵黄体和 一些 电子致密小颗粒 (Sg), 腺指数在 10.3~13.2之 间。各期抱卵蟹取 自 这些 sg直接参与卵黄体的形成。囊泡周边 由 抱卵蟹池,根据抱卵时间和光镜镜检把胚胎发 极细微 的膜性颗粒 (sg)组成,这些颗粒可能 由 育分为刚抱卵期 (卵裂期)、原肠期 (透 明区占 核糖体特化形成,它的作用可能是在整个卵中 1/3)、眼点期及心跳期 (80次 /分钟 )。 合成卵黄体物 质 s 然后 向囊泡中不断输入, 1.2 组织学观察 取一小块新鲜卵巢及不同 另外也可能起到一种框架作用,以保证 卵黄体 胚胎发育期的卵子,放入福尔马林一钙溶液 (固 发展的空间,以适应卵黄体 的快速形成 (图版 定脂肪 比较好)中固定 3天以上,接着取固定材 I:1见封 2,下同) 料少许于涂布有甘油明胶的载玻片上,再用另 随着囊泡中的卵黄体的发育和增大,卵黄 一 玻片压挤材料使其破裂,卵黄均匀分布在玻 体逐步充满囊泡,相邻的卵黄体闻有的进行融 片上 ,于 30℃恒温箱 中烘 干,然后按下列方法 合,形成较大的卵黄体。未进行融合的卵黄体 进行组化染色:中性脂肪用 Cain氏耐尔蓝法, 间仍 由膜性颗粒 sg间隔(见图 I:2)。 可使 中性 脂 肪 染成 红色;磷 脂 用 Menschidk 卵黄体大量形成时,也常可见有滤泡细胞 (1953)改进的硫酸耐尔蓝法,可使磷脂染成蓝 胞吞及滤泡细胞物质 向卵中扩散,参与卵黄体 色。 的形成 (图版 I:3)。 1.3 透射电镜观察 取 lmm3体 积大小的组 在卵黄发生的旺期,偶尔可见极少量 的脂 织块 ,经双 固定 (2.5%戊二醛和 1%锇酸)后 , 肪滴在囊泡 中形成 (图版 I:4)。总之,在这一 梯度 酒 精 脱 水 至 90%,然 后 换 丙 酮 包 埋 , 时期,卵仅 以卵黄体 Y 的积极合成为特征,很 Spurrs’1969包埋剂包埋,醋酸铀和柠檬酸铅双 难见到象下述成熟卵或胚胎 中的特征性脂肪滴 重染色。JEM100CXII透射 电镜观察。 L。 在中华绒螯蟹成熟卵中,是以大量脂肪滴 2 结 果 (L)的出现为特征的,卵黄体 (Y)和 L_几乎充 2.1 组织化学结果 无论在成熟卵巢的卵 中 满了整个细胞,并交互分布,但情 况又略有不 或各期抱卵蟹的胚胎中,既有磷脂也有中性脂, 同: 并交互分布 。不过可能 由于压片的缘故,被压 成熟不久的卵中,Y和 L都基本上呈规则 挤成的卵黄物质颗粒中,磷脂 (PL)于颗粒的 中 的圆形或椭圆型,大都被 或 sg包围或相互 部 ,被染成蓝色,呈 “o”型分布,由这 种 O型体 间隔,L间有融合趋势 (图版 I:5,7)。卵膜厚 组成卵黄体 (Y),中部透 明

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