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草莓的组织培养 草莓(Fragaria ananassa Ducde)是蔷薇科草莓属宿根性多年生常绿草本植物，是世界性水果。草莓还有一定的医疗价值，如对胃肠病、贫血病有一定的疗效。草莓是一年中成熟最早的水果，春末夏初即可采收投放市场。草莓产业链较长，可加工成果酱、果汁、果酒、饮料、果糕、果脯及各种食品，同时是“农家乐”项目中的主要水果。但是草莓生产长期以来，都依靠传统的分株繁殖法生产种苗，病毒病成为草莓生产的瓶颈，以茎尖培养法结合脱毒，用试管苗进行繁殖，是解决草莓生产中这一问题的途经。 1草莓茎尖培养之一 （1）材料与方法 品种为“丰香”，自田问选取健壮草莓母株上生长充实而小叶尚未展开的匍匐茎顶端约3～4 cm长的顶芽，用自来水冲洗2～3 h后，在超净台上进行灭菌处理。先用小镊子将匍匐茎的外部大叶摘除，再用70％ 酒精处理30s，用饱和漂白精液浸泡15min，然后用无菌水冲洗3～5遍。在双筒解剖镜下由外向内逐层剥去幼叶，直至半圆球的顶端分生组织充分暴露出来，切取0．2 mm、0．5 mm、1．0 mm左右大小茎尖接种于诱导培养基上，所有培养基均含有3％蔗糖，0．8％琼脂，pH值为5.6。培养条件：光照31．25 μmol／m ／s，14 h／d，温度25±2 0C。将分化的组培苗转接到增殖培养基上，增殖继代40 d或更长时间继代1次。将生长健壮的组培苗转接到生根培养基上。 试管苗驯化，生根培养20 d后，将生根试管苗瓶口打开，培养室内放置2～3 d取出后洗净其根部的培养基，移栽到炼苗基质上，温度保持在15～25~C，相对湿度85％-90％ ，适当遮荫，后期逐渐通风，增加光照，常规管理。 （2）结果 激素配比：草莓茎尖的成活与生长都需要BA的参与，而对NAA并无要求。BA的最适浓度在0．2～0．5 mg／L，而以BA 0．5 mg／L的成活率高，达66．7％ 茎尖大小：草莓茎尖成活率受剥取茎尖大小的影响非常大。在相同的培养基上，草莓茎尖越小，茎尖的成活率越低，反之，剥取的茎尖越大，茎尖的成活率越高。同时，试管苗的高度也呈相同的趋势，在诱导培养基MS+BA 0．5 mg／L上，0．2 mm的茎尖成活率为51．1％ ，苗高只有0．97 cm，0．5 mm的茎尖成活率为62．2％ ，苗高达到了1．52 cm，1．0 mm的茎尖成活率为68．9％ ，苗高也最高，为1．68 cm。茎尖大小直接影响着草莓茎尖在培养基中的成活率。 丛生芽的增殖：将诱导出的健壮苗转接到继代培养基上，培养35 d后，在BA为0．25 mg／L时，芽的增殖系数为2，当BA为0．5 mg／L时，芽的增殖系数为6．05，最优的增殖培养基为MS+BA 0．5 mg／L。 试管苗的生根：草莓是比较容易在培养基上生根，1／2 MS就可达到最好的生根效果，35d后，生根率达100％，平均根数为6．13条，长4．0 5．0 cm。 试管苗的驯化：将1—1．5 cm高生长健壮的试管苗移栽到温室，移栽于蛭石上的成活率最好，40 d后，达到98．33％ ；珍珠岩其次，为91．67％ ；最低的是蛭石+珍珠岩+草炭混和基质，只有63．33％ 。就生长状况而言，驯化成活的幼苗在蛭石+珍珠岩+草炭混和基质上的株高最高，平均为3．62 cm，总根长以草炭最好，达23．60 cm，而发根数以蛭石最多，平均有5．40条／株。 2草莓茎尖培养之二 （1）材料与方法 新世纪1号、章姬草莓品种匍匐茎，经0.1％升汞外植体表表面消毒，取茎尖为供试材科．进行芽诱导至生根移栽。培养基均附加蔗糖30 g／L和琼脂4 g／L，常规高压灭菌备用。培养条件：温度(23士2)℃，光照时间10～12h／d，光照强度1 500～2 000 lx，pH值5.8。 （2）结果 升汞处理时间：在同一培养基MS十6-BA 1．O mg／L+NAA O．1 mg／L培养基上，15天后观以o．1％升汞处理4分钟较为适宜，成活率46．67％。 不同植物生长调节剂配比：MS+6-BA 1．O mg／L+NAA O．1 mg／L为草莓不定芽诱导分化的适宜培养基 继代增殖：Ms+6-BA 0．5 mg／L+NAA O．01 mg／L为不定芽继代增殖的适宜培养基 壮苗生根：式管苗在继代增殖培养基中经多次继代后，也能形成根系，但苗弱，移栽成活率不高；转入去掉植物生长调节剂的MS培养基后，生长建壮，30天后移人基质，成活率可高达95％。 驯化移栽：组培苗生根后，炼苗2天后，揭瓶盖，洗掉琼脂，再用50％多菌灵可湿性粉剂500倍液浸泡30min，移入基质中。以腐质土：珍珠岩=3 : l为较好移栽基质，移栽成活率达95％；3月至5月上旬为最佳移栽季节。移栽1