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不同溶剂海芋提取物的体外抗肿瘤活性研究论文.doc
不同溶剂海芋提取物的体外抗肿瘤活性研究论文
【摘要】 目的研究海芋不同溶剂提取物的抗肿瘤作用。方法体外抗肿瘤活性研究采用MTT比色法,靶细胞采用人肺癌细胞株A549、黑色素瘤细胞株B16、人胃腺癌细胞株BGC-823、神经肿瘤细胞株NG108-15。结果海芋醋酸乙酯提取物对A549,B16,BGC-823的IC50分别为94.6, 541.9,629.5 μg·ml-1,丙酮提取物对A549,B16的IC50分别为40.9,438.0 μg·ml-1.freel Alocasia macrorrhiza in vitro.MethodsMTT method or cells treated Alocasia macrorrhiza in vitro, tumor cell A549, B16, BGC-823, NG108-15 Alocasia macrorrhiza to A549, B16, BGC-823 l-1 respectively,and those of the acetone extract from Alocasia macrorrhiza to A549 and B16 40.9,438.0 μg·ml-1 respectively. But there Alocasia macrorrhiza to all kinds of cell lines. The obvious acute toxicities acrorrhiza under the treatment doses of 60g·kg-1 and 36.5 g·kg-1 respectively.ConclusionThere is good cytotoxicity of the ethyl acetate and acetone extracts from Alocasia macrorrhiza to tumor cells,.freelor prospects.
Key acrorrhiza; Extract; Anticancer; Activity
海芋,别名广东狼毒、野芋、独脚莲、老虎芋等,为天南星科植物海芋Alocasia macrorrhiza(L.)Schott的干燥根茎,首载于《本草拾遗》,原称天荷。《本草纲目》始称为海芋,是岭南地区常用民间草药。《本草纲目》记载其主治“疟瘴毒肿风癞”,“可以治疠”[1]。《分类草药性》载其能“治一切恶疮肿毒”。《广西中药志》总结近代临床经验,载其可治“肺结核、痧症、热病等”[2]。本品有清热解毒、消肿散结之功。现代临床用于高热、流感、风湿痛、疮疡肿毒、蛇虫咬伤等病症。近年来,民间也用海芋治疗恶性肿瘤。经上海中医药大学的可燕等[3]调查了解,目前上海市及其邻近地区各中药店、中医院出售的作“蛇六谷”使用的中药原植物均为海芋的根茎。蛇六谷广泛用来治疗各种肿瘤,如上海群力草药店用其治疗胃癌、胃腺癌、鼻咽癌、乳腺癌等,名中医陆德铭教授用其治疗乳腺癌[4]。所有这些资料表明,海芋中有对肿瘤有较好活性的化合物,所以本文对海芋的多种溶剂提取物进行了体外细胞毒活性测定,寻找有效的活性部位,并测定了活性较好的部位的急性毒性,为将该提取物开发为有效的抗肿瘤药物奠定了基础,同时为寻找海芋中的活性单体化合物指明了方向。
1 材料
海芋采自云南省勐腊县勐仑镇,经中国科学院西双版纳热带植物园任盘宇老师鉴定为Alocasia macrorrhiza (L.) Schott。作为药材用其根部。人肺癌细胞株A549、黑色素瘤细胞株B16、人胃腺癌细胞株BGC-823、神经肿瘤细胞株NG108-15均购自中科院上海细胞库。植物提取、分离过程中用到的溶剂均为分析纯,为天津元立公司产品;MTT(四氮唑)为Sigma公司产品;FBS(胚胎牛血清)为美国Hyclone公司产品;RPMI1640和DMEM培养基为美国Gibco公司产品;Trypsin(胰蛋白酶)为上海林叶生物科技有限公司产品。
2 方法
2.1 海芋不同溶剂提取物的制备
称取干燥的海芋根部1 500 g,将其在粉碎机上粉碎,然后从中取1 200 g,以每份200 g等分为6 份,分别用环己烷、石油醚、醋酸乙酯、丙酮、乙醇、水为溶剂进行提取,每种溶剂提取方法如下:用800 ml溶剂和药材混匀,然后将其放在恒温震荡水浴锅上进行提取,温度控制在50℃,同样的溶剂用量提取两次,12 h/次,合并提取液,然后不高于50℃用旋转蒸发仪将其蒸干,得各种溶剂的海芋提取物,然后在真空干燥箱中继续烘干至恒重。
2.2 MTT法测定
细胞培养条件为:37℃,5 %CO2 ,含10 %小牛血清的RPMI 1640 培养基。用胰蛋白酶消化癌细胞,以配制细胞悬液
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