家兔肝抑素对大鼠肝癌的作用论文.docVIP

　　家兔肝抑素对大鼠肝癌的作用论文 .freela 【Abstract】 Objective To study the therapeutic effect and protective effect of experimental hepatocellular carcinoma in rats a rats ine(DEN).The changes of hepatoma nodules and ratio of liver/body yl transferase(γ-GT) and alkaline phosphatase(ALP) and the pathological changes of livers ic parameters etry.Results HC of high dose group ycin(ADM) group，the protective effect might be to postpone advancement of G0-G1 phase cells.HC of appropriate dose group e as ADM group，and the protective effect might be to postpone advancement of G2-M phase cells.Conclusion The HC in this study could inhibit the prolifiration of hepatoma cells and delay the forming of hepatoma. 【Key a；diethylnitrosamine 肝抑素（hepatic chalone，HC）是由生物正常肝细胞通过自分泌和旁分泌作用产生的、能抑制肝细胞增殖的一种分子量为13500的多肽蛋白质.freeline，DEN)诱发的大鼠肝癌模型，采用病理学、血清生化指标和细胞动力学的方法，研究HC对大鼠体内肝癌的治疗作用和作用环节。 1 材料与方法 1.1 动物分组 选取健康雄性SD大鼠（由广东医学院实验动物中心提供）60只，体重100～120g，随机分为6组(每组10只):正常组、模型组、阿霉素（adriamycin，ADM，由浙江海正药业股份有限公司生产）组和HC（本实验室提纯［2］）治疗组:A组，大剂量；B组，中等剂量；C组，小剂量。 除正常组外，其余5组大鼠在饮水中均加入0.01%DEN（Sigma公司产品），喂养90天，停止喂养DEN，然后开始治疗。 1.2 治疗方法 正常组和模型组每天1次腹腔注射生理盐水0.5ml/只，而ADM组每天1次腹腔注射ADM 3mg/kg，A组每天1次腹腔注射HC 9mg/kg，B组每天1次腹腔注射HC 3mg/kg，C组每天1次腹腔注射HC 1mg/kg。给药处理30天。 ADM剂量的选择以临床化疗剂量30mg/m2为依据，按人与大鼠间体表面积折算的等效剂量比值表计算得出。取折算得出的ADM剂量为HC的中等剂量(3mg/kg)，并由此得出HC的大剂量(9mg/kg)和小剂量(1mg/kg)。 1.3 常规检查 称体重，解剖大鼠，取出肝脏，称肝重，计算肝重比体重，记录肝表面癌结节数。 1.4 生化检测 断头取血，收集血清，用放射免疫测定法检测血清甲胎蛋白（AFP）的分泌量，用7170A型自动生化分析仪(由日本岛津公司制造)测γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）、碱性磷酸酶（ALP）的含量。 1.5 病理检查 统一取右叶肝组织，福尔马林液固定，石蜡包埋，制备成2μｍ厚的切片，HE染色，光镜下观察肝组织的病理变化。 1.6 流式细胞仪检测 取3块肝组织（每块约为1g），制备离散肝细胞悬液，以碘化丙啶荧光素染色显示核DNA，用流式细胞仪（美国BD公司产品，FACS Vantage）对样品进行DNA含量分析，得出各细胞周期的分布比率。 1.7 统计学方法 各组数据用x±s表示，组间比较采用t检验加方差分析。 2 结果 2.1 各组大鼠的生存率 实验结束时，各组大鼠的死亡数和生存率见表1。表1 大鼠死亡数和生存率 模型组5只大鼠的死亡原因均为腹腔内出血；ADM组3只大鼠的死亡原因也为腹腔内出血；A组2只大鼠的死亡原因同样为腹腔内出血；B组1只大鼠死于恶病质，3只死于腹腔内出血；C组4只大鼠的死亡原因也是腹腔内出血。 2.2 HC对大鼠肝癌病理改变的影响 尸检发现，正常组肝脏外观正常，无一例出现自发性肝癌，而模型组大鼠的肝脏明显增大，各叶散在大小不等的灰白结节，少数成巨块状。光镜下呈典型的柱状及腺管样癌巢结构，且癌巢周围肝细胞异型性明显，伴癌细胞浸润。ADM组、A