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毛细管电泳实验常见问题解答目次现象检查方案检查现象结果可能原因
毛细管电泳实验常见问题解答
目次 现象 检查方案 检查现象/结果 可能原因 解决方法
现 出 峰 品 样 无
用水冲洗毛细管,并观察是否有水流出,若无水流出
请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂;毛细管
毛细管堵塞或
没有电流 没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问
断裂
题。缓冲溶液需要过滤,将样品过滤或者离心去除其
中的颗粒。
将缓冲溶液超声脱气,如果还有此现象发生,则可能
缓冲溶液中有
是样品区带有析出,可以通过降低样品浓度/ 延长
电流波动很大,直至 气泡产生或者
ramp time 来试图解决这一问题;对于在缓冲溶液中
几乎消失 区带中样品析
溶解度不高的样品则需要在缓冲溶液中加入添加剂以
出
解决此问题。
电流初始值较小,后 样品进样量过
检查电流是 减少进样量,通常进样参数设置在0.5psi,5sec 左右
逐渐增大 大
否稳定
1 样品浓度过低 使用高浓度样品测试,如果无法解决则有可能是以下
其他原因
检测波长设置 请确认被分析物的特征吸收,检查方法中的检测波长
不正确 设置
对于蛋白样品,请注意蛋白在分离条件下其 PI 及所
电流正常 分离极性错误
带电荷;对于核酸样品,通常条件下会带负电荷
样品在毛细管 对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离,或
内壁吸附 采用极端pH 条件或动态涂层防止样品吸附。
光学检测器或 进行标准样品的测试,如果没有对应的结果出现,则
光纤损坏 有可能存在硬件问题,请联系工程师
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