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FISH检测标本要求 新鲜活检或手术切除标本； 石蜡包埋组织或石蜡切片（3－5um）； 肿瘤穿刺活检组织或细胞涂片； 骨髓穿刺组织尽量送涂片，不用活检组织（因为脱钙需要使用盐酸，破坏DNA）； 肿瘤细胞阳性的胸腹水涂片； 一般在3个工作日后可以发出检测报告； EBV-DNA定量PCR结果的稳定性分析 EBV-DNA定量PCR标准样品扩增曲线 鼻咽癌检测结果比较 5个不同样品重复检测； 扩增可靠性99.4%； 每个样品同时进行5次重复，结果重复性很好； 同时扩增，结果存在显著差异的为8％； 不同时间扩增，结果存在显著差异的为6.7％。 不同类型的淋巴瘤有各自不同的染色体易位 使控制细胞发育分化过程中的关键蛋白失活 与淋巴瘤的发生密切相关 IGH/BCL2 t (14;18) (q32;q21) 染色体易位 IGH/MYC t (8;14) (q24;q32) 染色体易位 IGH/CCND1 t(11; 14)(q13;?q32)?染色体易位 API2/MALT1 t(11;18)(q21;q21)染色体易位 IGH/MALT1 t (14;18) (q32;q21)染色体易位 BCR/ABL t(9;22)染色体易位【费城染色体】 目前开展的染色体易位检测（6种）： t (14;18) (q32;q21) 染色体易位 意义： t (14;18)易位后形成的IGH/BCL2基因能编码完整BCL2 蛋白，IGH基因附近的增强子使BCL2 过表达 t (14;18)为FL的标志（低级别更易出现）,检出率达93%～100% DLBCL 20% ～ 30%出现易位 影响检出率的原因： 石蜡标本中DNA的降解 FL3b接近DLBCL，其易位率低，影响总体检出率 5 3 C region V region J region 14q32 region 3 MCR MBR 18q21 region IGH/BCL2 Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe 探针杂交示意图 肿瘤细胞核IGH/BCL2 双色双融合 易位探针杂交后显示1O1G2F信号 细胞核IGH/BCL2双色双融合 易位探针杂交后显示2O2G信号 正常: 2O/2G 异常: 1O/1G/1F 阳性标准: 7%的细胞出现黄色融合信号 IGH: 14q32 BCL2: 18q21? green/orange IGH / BCL2 探针定位 标记颜色 检测探针 病例1：会诊84363，男，74y 腹腔肿物； FISH：54%的细胞可见融合信号； 诊断：FLⅡ~Ⅲ。 4× 40× 100× 病例2：会诊84362，女、36 颈部肿物 抗炎治疗后（出现变性坏死） 诊断：DLBCL FISH：阳性，10%的细胞可见融合信号 40× IHC:BCL2 100× t (8;14) (q24;q32) 染色体易位 意义： t (8;14)易位后形成的IGH/MYC基因能编码完整MYC蛋 白，IGH基因附近的增强子使MYC过表达 应用范围： 所有Burkitt淋巴瘤都有t (8;14)易位 诊断不典型Burkitt淋巴瘤须有t (8;14)易位的MYC异常 可见于继发于滤泡性淋巴瘤的前驱B淋巴母细胞白血病/ 淋巴瘤 MYC 8q24 region 14q32 region C region V region V region C region IGH/MYC, CEP8 Tri Color, Dual Fusion Translocation Probe 探针杂交示意图 正常细胞核IGH/MYC, CEP8 三色双融合易位探针杂交后显示2R2G2A信号 探针定位 标记颜色 检测探针 正常:2G/2O/2A 异常:1G/1R/2F/1A或2A 8p11.1-q11.1 aqua CEP 8? 8q24 orange LSI MYC? 14q32? green LSI IGH? 肿瘤细胞核IGH/MYC 双色双融合 易位探针杂交后显示1O1G2F信号 10× 40× 病例3: 399318，女、5y 颈淋巴结活检； ISH: EBERs（+）； FISH:45%的细胞可见融合信号； 诊断：散发性经典型BL。 病例4: 405618，女，21y 盆腔肿物穿刺； ISH: EBERs（+）； FISH: 23%的细胞可见融合信号； 诊断：考虑为散发性经典型BL。 4× 40× 活检穿刺标本 病例5:399625，男、42y ISH:EBERs（-