农残分析11-液2资料.ppt

液液色谱中采用极性固定相和非极性溶剂作流动相，称为正相液液色谱（流动相极性小，固定相极性大）。 该两相也可以交换，即采用非极性固定相和极性流动相，称为反相液液色谱（流动相极性大，固定相极性小 ）。 4.2.1 柱填充剂 (1) 薄壳型填料 由30一40 μm的玻璃微球表面涂覆1μm的表面多孔物质如硅胶、氧化铝等。 (2) 全多孔微粒型填料 包括硅胶、多孔硅球等。颗粒细度3－10μm，柱效高，试样容量大，分析速度快。 以上两种填料可作为载体，涂以适当的固定液即可作为固定相。 正相液液色谱使用β，β’－氧二丙腈、聚乙二醇，反相液液色谱常用角鲨烷、氰乙基硅醇等固定液。 4.3.2 化学健合固定相 化学键合固定相一般都以全多孔微柱或薄壳型硅胶为基体，先将硅胶进行酸洗，中和，干燥活化，使其表面保持自由硅醇基，有机基团在硅胶表面的键合型主要有： (1) 酯化键合(Si—O—C型)：它是由硅醇基与各种醇如氯乙醇、正辛醇、聚乙二醇等在一定温度下加热酯化后生成的单分子键合固定相。 固定相的Si—O—C键容易断裂，当用极性强的溶剂如水、醇等、键合的有机基团易被水解或醇解，所以只能在正相色谱中使用极性小的溶剂。 (2) 硅烷化键合(Si—O—Si一C型)：以氯硅烷与硅胶表面羟基作用并聚合交联成网状结构而得。 如使用较大的硅烷化试剂时，硅胶表面的硅醇基不能完全参与键合反应，在非极性键合相中硅醇基使极性化合物色谱峰拖尾，为此可在键合反应后，用小分子的三甲基氯硅烷进行补充硅烷化，以尽量减少硅醇基。 Si—O—Si—C型是目前应用最厂泛的键合相，具有相当的耐热性与化学稳定性，在70℃以下和pH 2-8范围内都可工作。 反相键合相色谱用的固定相表面部是极性小的烃基，如十八烷基、辛烷基和苯基等，而采用强极性溶剂如水、甲醇、乙腈或无机盐的缓冲液作为流动相。 固定相表面键合极性有机基团称为极性键合相，最常用的有氰基(-CN)键合相，其性质与硅胶相似，极性较硅胶弱，在正相色谱中使用，以非极性或极性小的溶剂(如烃类)加入适量极性溶剂(如氯仿、甲醇、乙腈等)以调节控制洗脱液的强度，极性弱的先出峰。 4. 4 液液分配色谱流动相 在常规液液色谱中，使用极性固定相和非极性或弱极性流动相，极性最弱的组分先流出，增加流动相的极性将降低洗脱时间，反相色谱法则相反，是使用极性或弱极性固定相和极性流动相，极性最强的组分最先流出，流动相是水和甲醇或水和乙腈的混合物，增加流动相的极性，将增加洗脱时间。 正相和反相液液色谱的区别： 正相 反相 固定相极性 极性大或中等 极性小或中等 溶剂极性 极性小或中等 极性中等或大 样本洗脱次序 非极性先出来 极性强先出来 增加溶剂极性的效果 降低洗脱时间 增加洗脱时间 反相色谱用的流动相是以水为基本溶剂，水的极性很大，用它分离非极性组分，保留值太大，加入与水互溶或部分互溶的有机溶剂为调节剂，最常用的是乙腈和甲醇，因为它们的粘度较小，易于提纯，紫外吸收截止波长较低。 单用甲醇、乙腈作流动相时，洗出能力很强，与水或水缓冲溶液配成混合液，可得到中等强度的流动相，改变水—甲醇或水—乙腈的配比，可改变样品组分的K’值，因而获得较好的分离。目前在农药分析中反相色谱用得最多，因为甲醇、水等流动相易得，价格便宜。 4.5 液液离子对色谱 离子对色谱是离子对萃取法的原理在液相色谱中的应用和发展。又称离子对分配色谱。分为正相和