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358 杨建军 等/WAVETM 生物反应器灌注培养生产种子细胞的开发和应用 生 物 工 程 学 报 Chinese Journal of Biotechnology March 25, 2012, 28(3): 358−367 /cjbcn ©2012 Chin J Biotech, All rights reserved 生物技术与方法 WAVETM 杨建军，隋礼丽 通用电气 ( 中国) 研究开发中心有限公司Fast Trak 中心，上海 201203 杨建军, 隋礼丽. WAVETM 生物反应器灌注培养生产种子细胞的开发和应用. 生物工程学报, 2012, 28(3): 358−367. Yang JJ, Sui LL. Development and application of perfusion culture producing seed cells in WAVETM bioreactor. Chin J Biotech, 2012, 28(3): 358−367. 摘 要: 近年来，国内中国仓鼠卵巢细胞 (Chinese hamster ovary ，CHO) 生产罐的培养规模已达上千升，国 外已达上万升，最终的生产罐前需要多级摇瓶、种子罐进行种子细胞扩增，扩增效率较低，严重影响了抗体、 融合蛋白等生物制品的生产效率。文中利用 WAVETM 波浪式生物反应器，通过灌注培养的方法，成功地实现 了种子细胞的高效扩增。WAVETM 波浪式生物反应器灌注培养方法制备种子细胞，CHO 细胞密度高达 7 5 2.28×10 cells/mL 时仍处于指数生长期且细胞活力大于 95 ％，以此细胞作为种子细胞，4×10 cells/mL 接种于 另一个 WAVETM 生物反应器进行流加培养，最大活细胞密度仍可达 1.73×107 cells/mL 。通过此种扩增方式，1 台WAVETM 20/50 即可为 1 000 L 或 2 000 L 的生产罐提供种子细胞，种子细胞的扩增倍数 (Split ratio) 可以达 到 1 ∶50~1 ∶100 倍，与传统不锈钢罐种子细胞扩增倍数 1 ∶2~1 ∶10 相比，可以显著减少 2~3 级种子罐，种 子细胞的扩增时间减少 7~9 d ，极大地提高生产效率。 关键词: WAVETM 波浪式生物反应器，灌注培养，种子罐 Development and application of perfusion culture producing seed cells in WAVETM bioreactor Jianjun Yang, and Lili Sui Fast Trak Center, GE (China) Research and Development Center Co. Ltd., Shanghai 201203, China Abstract: In recent years, Chinese hamster ovary (CHO) production vessel volume has reached more than 1 000 L in Chinese biopharms, and 10 000 L in foreign big biopharms, such as Lonza an