实验DNA的粗提取和鉴定.pptVIP

本学期最后阶段的安排 利用三周时间完成选修一《生物技术实践》 7月4、5、6日期末考试（没有复习时间） 期末考试范围：模块三和选修一 选修一：生物技术实践 课标要求 本模块适于继续学习理工类专业或对实验操作感兴趣的同学学习。 培养同学设计实验、动手操作、收集证据等科学探究的能力，增进学生对生物技术应用的了解。 根据本校的条件，选做本模块中的5～7个实验。 学习内容 实验一：DNA 粗提取和鉴定 实验二：DNA片段的PCR扩增和电泳检测 实验三：大肠杆菌的培养与分离 实验四：果酒及果醋的制作 实验五：泡菜中亚硝酸盐含量的测定 实验一：DNA的粗提取和鉴定 实验原理： （一）DNA的粗提取 1、 DNA在NaCl溶液中的溶解性 实验原理 2、DNA不溶于酒精，蛋白质溶于酒精 3、洗涤剂能瓦解细胞膜，对DNA没有影响 【实验】 DNA的粗提取和鉴定 （一）选取哪种实验材料？ （二）如何破碎细胞，获取含DNA的滤液？ （三）如何去除滤液中的杂质及析出DNA? （四）如何鉴定DNA？ 实验结果：（一）粗提取 实验结果：（二）鉴定 如何使鉴定效果明显？ 菜花量 研磨是否充分 析出量 取絮状物的量 溶解的NaCl量 加热时间 注意事项 两人一组 研磨要充分（10分钟） 将研磨产物包入纱布，挤压研磨液到小烧杯中。 将小烧杯中的滤液倒入离心管中，离心2分钟。 小烧杯中先加酒精再加DNA滤液，用玻璃棒缓轻搅拌。 鉴定时，二苯胺现配，四组共用，沸水浴加热10分钟 实验过程中空余时间的安排： 1、清洗整理实验用具 2、完成讨论题 3、预习实验：生物技术实践模块P66,实验13 PCR扩增 * （二）DNA的鉴定 在沸水浴中，DNA遇二苯胺会被染成蓝色 植物细胞：菜花 动物细胞：鸡血细胞 动物细胞：加蒸馏水搅拌过滤，用NaCl溶解 利用不同浓度的NaCl溶液反复溶解和析出后再用95%酒精析出 或直接利用95%酒精去除杂质同时析出 用适宜浓度的NaCl溶液溶解 加二苯胺，沸水浴加热 植物细胞：加研磨液研磨过滤、离心 （洗涤剂、NaCl、 DNA酶抑制剂、缓冲液） * * * 本次实验用菜花，具体操作步骤见实验指导。强调注意事项。 结合课标要求和北京市学科指导意见，确定上述实验