干细胞2-成体干细胞.pptVIP

3、神经干细胞 神经干细胞体外培养和建系，必须满足两个基本条件： ①具有永生化特性 即在细胞周期内不断地复制增殖，产生大量子代细胞； ②具有神经干细胞世系遗传显性特性 即神经干细胞表型，在适当的环境和条件下，它可分化为神经元和包括星形细胞、少突胶质细胞及Schwann`s细胞等在内的神经胶质细胞。 体外培养建系 早期胚胎的神经管和神经嵴或胎儿的脑组织是体外培养神经干细胞的最理想材料来源。 首要问题是维持其分裂、增殖的能力。 基本培养基是一种特定的N2液。添加因子有葡萄糖、人胰岛素、人转铁蛋白、黄体酮、二氢氯丁二胺、硒酸钠、谷氨酰胺和肝素等。 细胞传代时，用手术刀片沿着神经球中间的纵横轴切割成四等份，则神经干细胞可维持稳定而快速的生长。 生物学特性 未分化的神经干细胞一般每隔7－10天细胞数可增加一倍，一般可传35代，历时一年，在这期间，细胞系可分化为神经元、少突神经胶质细胞和星形细胞等多能性。 成体干细胞研究中的问题 限制成体干细胞应用的主要因素是来源困难 成体干细胞在体外传代中端粒酶活性很快下降，可能是造成成体干细胞不能在体外大量扩增的主要原因. 1、异质性 2、干细胞所处环境 3、可塑性的调控 4、分化细胞的功能 5、体外增殖 1、异质性（heterogeneity） 指由于不同遗传机制而产生相同或类似的表现型。异质性在某种程度上是干细胞固有的特性。 成体干细胞的可塑性是否与干细胞异质性直接相关？一种干细胞与其组织来源及归宿之间的确切关系？等，还需要深入的研究。 2、干细胞所处环境 环境的信号对干细胞的分化命运有着重要影响。 如，小鼠造血干细胞和胰腺干细胞都能分化出肝细胞，并能修复小鼠受损的肝组织，但，移植造血干细胞和胰腺干细胞对修复小鼠受损的肝组织的效果远远比移植成熟肝细胞本身差得多。 干细胞在接受亚致死剂量照射等异常环境下被观察到“可塑性”现象，人们还难以解释。 3、可塑性调控 外源性 内源性 体液因子、同种或异种细胞的接触、细胞外基质等的作用 大多数干细胞的可塑性研究是基于组织损伤而造成的微环境 一般认为转录因子在其中起着重要的作用。 尚在 起步阶段 成体干细胞“可塑性”调控的解释(4种)： ①机体中存在着多种来源和不同分化方向的成体干细胞群体，能定向地向各自的组织来源的细胞分化； ②机体中存在着一种多潜能的成体干细胞，在不同的微环境信号刺激下，可向不同组织的细胞方向分化； ③特定组织来源的成体干细胞，除了向该组织的细胞分化外，在特殊信号的刺激下，可重新编程，继续分化为其他类型的细胞； ④某种成体干细胞与特定组织来源的干细胞发生融合，产生具有两种细胞的遗传物质且染色体数量也是正常细胞两倍的“杂交细胞”，因而获得了后者的分化潜能。 4、分化细胞的功能 检测终末分化细胞的特定蛋白或标志物的表达，很少检测终末分化细胞的功能，有些不同类型的细胞却具有相同的标志。 检测到某种标志就证明该细胞或组织具有正常功能持有质疑，特别是干细胞的异质性和类型以及环境的复杂性使得人们对体外培养的干细胞移植入体内能否发挥预期功能表示怀疑。 要确定供体干细胞的终末分化状态，应该基于细胞表面标志的鉴别和细胞功能证明这两方面的依据。 5、体外增殖 尚无有效的能较长期在体外维持未分化状态并大量增殖的体外培养方法。 大多数成体干细胞是用于再生医学作细胞治疗的目的，通常设计使用两种手段： ①将分离的成体干细胞直接移植入动物或病人的损害组织器官，在受损组织原位分化出该组织中成熟的功能性的细胞； ②在体外将干细胞诱导分化为所需要的成熟细胞，随后将细胞移植入损害组织器官。 鉴于成体干细胞很难分离、纯化和体外培养，因而，目前这两种都不能奏效。 一个典型的例子是将烫伤病人的、含有皮肤干细胞的健康皮肤切取下来，进行短暂体外培养，再重新植回病人的皮肤损害部位，发现尽管皮肤可愈合，但不能产生汗腺和毛孔，无法行使正常功能。 成体干细胞在再生医学中的应用 向传统的细胞分化和细胞周期性理论提出了挑战 在细胞生物学行为上与癌细胞相似，形成了研究癌症发生机理的一个新生长点。 在再生医学中，可望利用成体干细胞于创伤修复、疾病的细胞治疗，以及整形外科学和组织工程学等方面的需要。 组织工程化皮肤 骨髓与组织工程 组织工程化骨骼 我国成体干细胞研究获重大进展 首次在世界上建立了人胎儿胰腺干细胞系。 首次采用冻存的角膜缘干细胞和无饲养层细胞培养体系构建角膜上皮组织移植片，对角膜缘干细胞缺损的治疗提供了新的措施。 首次以人羊膜为载体负载表皮干细胞，构建组织工程化角膜上皮植片，移植后具有正常角膜相似的组织结构。 成体干细胞 Adult stem cells 概　述 成体干细胞分化的可塑性 成体