比较肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏和血管的影响.pptVIP

自主设计实验 比较肾上腺素和去甲肾上腺素 对心脏和血管的影响 实验方法与步骤 * * [实验目的]  学习记录哺乳动物动脉血压，血管收缩舒张的直接测定方法并了解哺乳类动物心脏离体灌流方法（Langendorff 氏法），以此比较肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏和血管的作用。 [实验原理] ①哺乳动物从心脏从动物体摘取之后，用有一定压力、温度（37℃）并充氧的修正洛氏液经主动脉根部灌流。灌流液经 冠状动脉口进入冠状血管营养心脏，以维持心脏的节律性活动，即Langendorff 氏法②　 血管收缩 α 大剂量 β2 血管收缩 全身血管 小剂量 骨骼肌，肝 皮肤，胃，肾肠，血管平滑肌 血管舒张 血管收缩 α 部位 血管 心脏 血管 心脏 α 三正效应（弱） 三正效应 产生作用 结合受体 激素 β1 去甲肾上腺素 β1 肾上腺素 [3] [实验对象] 　　家兔。 [4] [实验药品] 　　生理盐水，20%氨基甲酸乙脂，肝素（500?U·ml-1），5:?100000肾上腺素，1:?10000去甲肾上腺素，95%O2+5%CO2饱和的K-H生理溶液，修正洛氏液。[5] [仪器与器械] 　　计算机生物信号采集处理系统（或二道生理记录仪、刺激器），兔手术台，手术器械一套，动脉夹，蛙心夹，滑轮，血压换能器，保护电极，37℃浴槽，4℃浴槽，金属钩，棉线，纱布，棉球、注射器（50、10、2?ml），支架，双凹夹。 实验准备 连接实验装置 实验项目 实验准备 （1）麻醉和固定：家兔称重后，耳缘静脉缓慢注射20％氨基甲酸乙酯（5?ml·kg-1）或3%戊巴比妥钠（1?ml·kg-1）进行麻醉。当动物四肢松软，呼吸变深变慢，角膜反射迟钝时，表明动物已被麻醉，即可停止注射。将麻醉的家兔仰卧位固定于兔手术台上。 （2）离体心脏环境的准备，包括恒温、恒压灌流和供气三个部分。①配置修正洛氏液（原料参考有关文献）的原液时先加蒸馏水(总体积 90%左右)，再依次加入上述试剂，但加 NaHCO3 时应逐滴加入，并不断摇晃混匀， 防止形成 CaCO3 沉淀，最后再加入蒸馏水，补足液体量。②将灌流系统用胶管连接，灌流液瓶灌满灌流液。调整灌流液瓶的高度使灌流压力达到实验要求，一般 要求灌流液瓶中心管的下端距心脏的高度为 70～90cm，可按心脏的大小而适当调整。③混合气瓶（或球胆）的减压阀出口用软管接至灌流管内的充气管，调节气瓶上的减压阀，使灌流液中 的气泡连续且小而均匀。④.调节恒温循环器使心脏插管内的灌流液温度恒定在 37℃左右。为了保证离体心脏的表面有一定的温度 和湿度，将心脏置于由玻璃或有机玻璃制成的保温灌流槽内。保温灌流槽的底部有漏斗形的开口，上方盖子盖住才可以保证保温灌流槽内温度恒定。 （3）家兔离体心脏的制备 (1).摘取心脏：取心脏前 20min，家兔腹腔注射肝素液抗凝((6ml/kg)。取心脏时迅速沿胸前壁正中剪开皮肤，打开胸腔，轻轻提起心脏，小心剪断腔静脉、主动脉及心脏周围组织，迅速将心脏连同一段主动脉取出。手术过程中注意不要损伤心脏， 主动脉根部要留 0.5~1cm 长度以备插管用。心脏取出后立刻置于预先备好的充氧的冷克氏液（4℃左右） 中，用手指轻压心室以利于其中的剩余的血排出，防止凝血块形成。心脏停跳后，迅速剪开心包膜并剪去 心脏周围的组织（包括肺组织、气管以及附着于心脏上的其他组织），认清主动脉、腔静脉及肺动脉的解剖位置，在主动脉根部穿一棉线备用。 (2).灌流心脏：将主动脉套进心脏插管口内，用棉线将主动脉和心脏插管结扎在一起并固定。插管进入主 动脉不宜过深，以免损伤主动脉瓣及堵住冠状动脉开口，影响冠状血管的灌流。心脏经充氧的温修正洛氏液灌流后，在 lmin 内即可开始恢复跳动，但起初心率较慢，并常有心律不齐，以后逐渐变快而且心律也逐步恢复正常和稳定并可维持数小时。 (4)家兔离体动脉环的制备：开胸取出心脏后，迅速开腹取肠系膜动脉，再肝动脉。将取出的血管立即移入95%O2+5%CO2饱和的K-H生理溶液内，仔细剔除粘附于动脉周围的脂肪结缔组织，分别截取5mm左右的动脉环。 连接实验装置　 （1）用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，并将连接蛙心夹的丝线通过滑轮连至张力换能器，调节与张力换能器相连丝线的松紧度，使心肌前负荷约 5g，记录心脏活动。调节固定保温灌流槽，使保温灌流槽罩住心脏。灌流液进入冠状血管后到右心房经腔静脉及肺动脉