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应用RTPCR分析食管癌组织中lrig1基因的表达论文.doc
应用RTPCR分析食管癌组织中lrig1基因的表达论文
闫尧 马军 唐芙爱 达嘎 祁秋干 李印
【摘要】 目的: 观察lrig1基因在食管鳞癌中的表达及意义. 方法: 采用RTPCR检测36例食管鳞状细胞癌癌组织、相应的癌旁组织和远癌组织中lrig1 mRNA的表达情况. PCR产物经凝胶电泳,比较3种组织中lrig1与GAPDH条带的灰度值之比,半定量分析lrig1 mRNA的表达水平. 结果: 36例食管癌组织中有15例(42%)lrig1 mRNA检测到阳性表达,21例(58%)lrig1 mRNA表达缺失,其阳性表达率低于相应的癌旁组织(92%)和远癌组织(100.0%,P 0.05);癌组织中lrig1 mRNA表达水平(0.76±0.22)低于相应的癌旁组织(0.89±0.33)和远癌组织(1.13±0.40);随着肿瘤分化程度的升高,lrig1 mRNA在癌组织中的阳性表达率也增加(P 0.05),但lrig1 mRNA表达缺失与食管癌临床分期(TNM),淋巴结有无转移和病理类型均无统计学差异(P 0.05). 结论: lrig1 mRNA在食管癌组织中存在表达缺失和低表达,提示lrig1基因在食管癌的发生发展中可能具有抑癌基因的作用.
【关键词】 lrig1基因;食管肿瘤;mRNA;逆转录聚合酶链反应
【Abstract】 AIM: To study the expression of lrig1 gene in esophageal squamous cancer and its significance. METHODS: The expression of lrig1 gene atched paracancer tissues and tissues far a tumor in 36 cases of esophageal squamous cancer. PCR products iquantified by calculating the ratio of the gray value of lrig1 bands and those of GAPDH bands respectively. RESULTS: The positive expression rate of lrig1 mRNA in 36 cases of esophageal carcinoma oradjacent tissues (91.7%) or esophageal mucosa far a tumor(100.0%) respectively (P 0.05). Semiquantified analysis shoRNA expression in esophageal cancer tissues (0.76±0.22) oradjacent tissues (0.89±0.33) and esophageal mucosa far a tumor (1.13±0.40). The higher positive expression rate of lrig1 mRNA RNA had no relationship ph node metastasis or histologic types in esophageal cancer (P 0.05). CONCLUSION: The expression of lrig1 mRNA is lost or reduced in esophageal cancer tissues, ay play an important role in suppressing the tumorigenesis and development in esophageal cancer.
【Keys; mRNA; RTPCR
0引言
人类lrig1基因.freelentas公司);PCR扩增仪(德国Eppendoff公司);高速台式冷冻离心机(德国Eppendoff公司);水平电泳仪(美国BioRad公司);DBT08型凝胶成像分析仪(美国UVITEC公司).
1.2方法
1.2.1标本收集于手术中收集标本,取材后速冻于液氮中,后于-80℃超低温冰箱中贮存备用. 标本取材大小均约0.5 cm×0.5 cm×0.2 cm;癌组织均在原发灶取材,避开坏死、炎症区域;癌旁组织取自相应肿块旁2 cm的食管黏膜组织;远癌组织均取自距肿块边缘5 cm以上的食管黏膜组织.
1.2.2引物设计lrig1基因引物用Oligo6.0软件设计,序列如下:上游5′CAG TGC ATA GCT GGA GGG AGT C3′;下游5′TA
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