球孢白僵菌蛋白酶、几丁质酶、脂肪酶活性与其毒力相关性.pdfVIP

维普资讯 24(3)290—292 中国生物防治 ChineseJournalofBiologicalControl 2008年 8月 球孢 白僵菌蛋 白酶、几丁质酶、脂肪酶活性与其毒力相关性 林海萍 ，魏锦瑜 ，毛胜凤 ，陈 喜 ，张立钦 ，马 良进 (1．南京林业大学森林资源与环境学院，南京 210037；2．浙江林学院林业与生物技术学 院，临安 311300) CorrelationBetween Protease，ChitinaseandLipaseActivitiesand Virulenceof Beauveriabassiana againstMonochamusalternatus LINHa1．ping，，WEIJin．yu，MAOSheng．feng2，CHENXi，ZHANGLi．qin，MALiang-jin (1．CoUegeofForestResourcesandEnvironment，NanjingForestryuniversity，Nanjing210037，China； 2．SchoolofForestryandBiotechnology，ZhejiangForestryUniversity，Lin’an311300，China) 关 键 词：球孢 白僵菌；蛋 白酶；几丁质酶；脂肪酶 ；毒力 中图分类号：$476．13 文献标识码 ：A 文章编号 ：1005．9261(2008)03．0290．03 松墨天牛 (MonochamusalternatusHope)，又名松褐天牛，是我国松林 目前最重要 的害虫 ，也 是传播毁灭性病害病原线虫松材线虫(BursaphelenchusxylophilusNickle)的媒介 昆虫 ，是松材线 虫病新疫点的最重要成 因之一 ，因此大力防治松墨天牛是保护我国松林 的关键_lI2。 球孢 白僵菌 (Beauveriabassiana)是一类广谱性昆虫病原真菌 ，能侵染 15个 目149个科 700 多种昆虫_3j，对环境和温血动物无害，易于培养，致病性强 ，已成为国内应用最广泛的昆虫病原 真菌。 目前已有大量的报道证 明球孢 白僵菌防治松墨天牛完全可行_463。国内外均有研究发 现球孢 白僵菌蛋 白酶、几丁质酶、脂肪酶 、淀粉酶等产生水平与其菌株毒力之 间存在一定 的相 关性 ’。。但球孢 白僵菌酶活性与其对松墨天牛毒力相关性 尚未见报道。本文研究球孢 白 僵菌蛋白酶 、几丁质酶 、脂肪酶活性 ，以及与菌株对松墨天牛毒力的相关性 ，以找出球孢 白僵菌 菌株的毒力表达因子 ，从而为 白僵菌防治松墨天牛提供理论依据与实用技术 。 1 材料和方法 1．1 供试昆虫与菌株 采 白浙江余杭的松墨天牛幼虫 ，实验室人工培养至4龄幼虫作为供试 昆虫。15个球孢白僵菌供试菌株 (表 1)接种到 PPDA斜面培养基上 ，27℃下培养 12d，收集孢 子配制成浓度为 1×10个 ／ml的孢子悬浮液。 1．2 培养基 蛋 白酶诱导培养基 ：1％明胶 (m／V)，K2HP04、NaC1和 MgS40 7‘H2O各 0．3g／L。 各组分溶入 pH7．0的0．02mol／L磷酸缓冲液。几丁质酶诱 导培养基 ：蛋白胨 0．5％，KH2P40、 KC1、Mgso4·7H，0各 0．05％，ZnS40 ·7H2O0．1％，脱矿几丁质 1％，pH6．0。SDA培养基 ：葡萄糖 40g／L、蛋白胨 10g／L、酵母浸膏 10g／L。PPDA培养基见参考文献_o。 收稿 日期：2007．10．18 基金项 目：国家 自然科学基金项 目 作者 简介 ：林海萍 (1973～)，女 ，博士生，副教授 。 290 维普资讯 第 3期 林海萍等 ：球孢 白僵菌蛋 白酶、几丁质酶、脂肪酶活性与其毒力相关性 表 1 球孢 白僵菌菌株来源 菌株 寄主 采集地 形式 菌株 寄主 采集