含双病原物诱导启动子植物安全表达载体的构建.pdfVIP

植物病理学报 ACTAPHYT0PATH0LoGlCASINICA 39(2)：153—159(2009) 含双病原物诱导启动子植物安全表达载体的构建 王丹丹 ，王 荣 ，唐丽丽 ，刘爱新h，孔维文 (山东农业大学植物保护学院，泰安 271018；。扬州大学园艺与植物保护学院，扬州 225oo9) 摘要：本研究用来 自烟草的具有高度病原物特异性的两个诱导启动子EAS4和hsr203J，串联驱动GUS基因的表达，同时 考虑到转基因植物的安全性，引入双边界序列，构建了含双病原物诱导启动子的植物安全表达载体。将表达载体转化烟草 获得转基因植株。分析显示，在正常生长情况下转基因烟草检测不到GUS活性，或活性极低；而受疫霉激发子parasiticein、 Phytophthoranicotianea[0]的孢子悬浮液和Ralstoniasolanacarum的菌悬液诱导后，转基因烟草叶片中可检测到明显的 GUS活性。结果表明，构建的植物表达载体所含双病原物诱导启动子均具有 良好的诱导活性，可用于植物遗传转化。 关键词：抗病基因工程；复合侵染；病原物诱导启动子；双边界序列 Constructofplantsafety expressionvectorharboringtwopathogeninduciblepro。 m oters WANG Dan．dna ，WANG Rong ，TANG Li—li。 LIU Ai．xin ，KONG Wei-wen (Department ， ofPlantProtection，Shandong AgriculturalUniversity，Taihn，271018，China； SchoolofHorticulture nad PlnatProtection， YnagzhouUniversity，Yangzhou，225009，China) Abstract：Plantsareoftensubjectedtoinfectionsofvariouspathogensinhteirwholelife．ThisisSOcalled complexinfections．Complexinfectionsofpahtogensalechallengedforgeneticengineeringofplantdiseasere— sistance．Inhtisstudyaplantsafetyexpressionvectorwasconstructed．ThevectorharboredtwinT—DNAsnad hteselectivemrakergeneⅣP ⅡexpressioncassettewasseparatedindifferentT—DNAsfromhteGUSexpre— ssioncasseReinwhichtwo highly pahtogen-specificinduciblepromoters，EAS4andhsr203J，wereusedto drivereportgene．Transgenicplnatswereobtainedfrom htetrna sformationoftobaccobyhtevector．Th eGUS activiyt couldnotbedetectedorwasverylow inhtetransgenictobaccoplnatswithoutinduction．Whereashte GUSactivitywasmuchhigherwhenhteplnatswererteatedwiht parasiticeinorinoculatedwiht sporesuspen- sionsof ytophthoranicotianea[0]nadRalstoniasolanacarum．Theresultsshowedhtathtetwopromotersin transgenicplna tswerehighlypahtogen--specificinduciblena dcouldbeusedasapowerfultoolforgeneticengi-· neefing inplna tdiseaseresistance． Keywords：Geneticengineeringfordiesaseresistance；complexinfectionsofpahtogens；pahtogeninducible