香蕉果实特异表达启动子驱动下的乙肝表面抗原基因植物表达载体的构建.pdfVIP

维普资讯 果 树 学 报 2008，25(5)：691-694 JournalofFruitScience 香蕉果实特异表达启动子驱动下的乙肝表面 抗原基因植物表达载体的构建 胡 伟 ，徐碧玉 ，张建斌 ，杨晓颖 ，李美英 ，宁文彬 ，金志强 (中国热带农业科学 院热带生物技术研究所 ，海南大学农学院，海 口 571101) 摘 要：研制经济方便的新型乙肝植物 口服疫苗是全球控制 乙型肝炎的现实要求 。研制 乙肝植物 口服疫苗遇到的一 个主要的困难是 HBsAg基因在受体植物中的表达量低 。香蕉是植物 口服疫苗理想的受体 。因此 ，以香蕉为受体 ，进一 步提高HBsAg基 因表达量的研究非常必要 。从 pBIL2载体上克隆了香蕉果实特异表达 的BanLec启动子 ，并引入 了 Hindm、BamHI酶切位点 ；利用 EcoRI和BamHI双酶切 YEPFLAG—HBS获得 了HBsAg基 因；通过BamHI酶切位 点，利用 T4DNA连接酶连接了BanLec启动子和 HBsAg基 因，形成 BanLec—HBsAg连接片段 ；再把该片段通过 EcoR I、Hindm酶切位点插入 pCAMBIA2300植物表达载体 ，成功构建香蕉果实特异表达启动子驱动下的乙肝表面抗原 基因表达载体 关键词：香蕉 ；果实特异表达启动子 ；乙肝表面抗原；表达载体 ；构建 中图分类号：$668．4 文献标识码 ：A 文章编号：1009—9980(2008)05—691—04 ConstructionofvectorforexpressionofHBsAggenedrivenbyabanana fruitspecificpromoter HUWei1,2XUBi-yu，ZHANGJian-bin ，YANGXiao-ying ，LIMei-ying，NINGWen_bin1,2,JINZhi- qiang (InstituteofTropicalBioscienceandBiotechnology，ChineseAcademyofTropicalAgriculturnScience，CollegeofAgriculture，HainanU- niversity，Haikou，Hainan571101China) Abstract：Thereisahil曲 demandfordevelopmentofnewconvenientedibleplantvaccinesagainsthepatitisB．Atpresent， low expressionofHBsAggeneinplantislimitingthedevelopmentofedibleplantvaccineagainsthepatitisB．Bananaisre_ gardedasthemostidealplantreceptorforediblevaccine．ImprovingtheexpressionlevelofHBsAgisessentialinbanana．In thisstudy，weclonedabananafruitspecificpromoter(BanLec)addedtoHindmandBamHIfrompBIL2vector；wedigested theYEPFLAG—HBSvectorwithEcoR IandBamH ItogainHBsAggene；weconnectedabananafruitspecificpromoter (BanLec)toHBsAggenebyBamH ItoproduceaBanLec—HBsAgsegment．ThesegmentwasinsertedintoPCAMBIA2300 byEcoRIandHindm ．WesuccessfullyconsturctedplantexpressionvectorforHBsAggenedrivenbyBanLec． Keywords：Banana；Furitspecificpromoter；HBsAg；Expressio