黑穗醋栗花中RNA提取方法的比较研究.pdfVIP

第 4l卷 第 9期 东 北 农 业 大 学 学 报 41(9)：72~75 2010年 9月 JournalofNortheastXgnculturalUniversity Sep．2010 黑穗醋栗花中RNA提取方法的比较研究 赵 慧，李兴国，于泽源 (东北农业大学园艺学院，哈尔滨 150030) 摘 要：以黑穗醋栗花为试验材料，利用紫外分光光度计和凝胶 电泳法比较 了Trizol法、硼砂一SDS法、 CTAB法、植物RNA提取试剂盒等4种方法提取总RNA的质量和纯度。结果表明，利用硼砂一SDS法提取的 RNA，28S和 18S两条带型清楚，两条带之 间无弥散现象，且纯度最高，D ，D 达到2．06，经计算得 出总RNA 产率达 61．60 g·，反转录条件下可得 500～1000bp之间的弥散 cDNA条带，进一步证明硼砂一SDS法提取得到 的总RNA具有很高的纯度，可以满足进一步分子生物学研究的需要。 关键词：黑穗醋栗 ；花 ；总RNA；RNA提取 中图分类号：$663．9；Q522 文献标志码 ：A 文章编号：1005—9369(2010)09—0072—04 Analysisandimprovementofhigh-qualityRNA extraction inflowerof blackcurrant／zHAOHui，LIXingguo，YUZeyuan(CollegeofHorticulture，NortheastAgricultural University，Harbin150030，China) Abstract：CTAB method，Borax-SDS method，Trizolmethod，PlantRNA outKitmethodwere employed to extracttotalRNA inflowerofthe ripe blackcurrant．Through UV spectrometerand gel electrophoresisindicatedsuchasthetotalRNAextractedfr0mf0urkindsofqualityandpuriyt．Theresults showedthattheuseofBorax—SDSextractionofRNA，28Sand18Stwobandingpaffernsclearlybewteenthe twowithnodispersionphenomenon，andthehighestpurity，D260／D2B0to2．06，calculatedthatthetotalRNA yieldof61．60 g·g～，reversedthetranscriptaseundertheconditionsoftheavailable500—1000bpdispersion amongthecDNA bands，thefurtherevidenceofBorax-SDSmethodoftotalRNAwereextractedwithhigh purity，tomeettheneedforfurthermolecularbiologyresearch． Keyw ords：blackcurrant；flower；totalRNA：RNAextraction 从植物中提取较高质量的总RNA是顺利进行 方法。黑穗醋栗是虎耳草科茶藤子属小灌木，从当 基因表达模式 ，克隆基因等各种分子生物学研究 前的研究来看，关于黑穗醋栗分子生物学领域的研 的基础 。常用的RNA提取方法有异硫氰酸胍法_】1、 究报道较少，本研究的宗旨是筛选出适合黑穗醋栗 盐酸胍法 、苯酚法 【、SDS法l4l、CTAB法[51、LiCi 花中总RNA的提取方法，为黑穗醋栗分子生物学 尿素法6[1、热硼酸法l71、改 良Bugos法 【等。植物组 领域的研究提供理论依据和技术支撑。 织中的多