3种基础培养液对昆明小鼠ESC生长的影响.pdfVIP

新 疆 农 业 大 学 学 报 2010，33(4)：289~293 JournalofXinjiangAgriculturalUniversity 文章编号 ：1007—8614(2010)04—028905 3种基础培养液对昆明小 鼠ESC生长的影响 陈世彬 ，赵云程。，况 玲 ，叶小芳。，李 丽 ，黄俊成 (1．新疆农业大学 动物医学学院，乌鲁木齐 830052；2．新疆畜牧科学院 农业部畜牧兽医重点开放实验室，乌鲁木 齐 830000；3．石河子大学 动物科技学院，石河子 832003) 摘 要： 以昆明小 鼠的囊胚及胚胎干细胞为材料 ，用组成成份清楚的培养体系，研究不 同的基础培养液 (h— DMEM，DMEM／F12，KnockoutDMEM)对昆明小鼠胚胎干细胞生长 的影响。分别将小 鼠囊胚置于以上 3种培养液 为基础 的培养液 (M1、M2、M3)中，4d后观察原代集落形成率 ；取正常培养较小的胚胎干细胞集落 ，分别接种在上述 培养液中培养观察 ；单细胞传代并观察结果；以碱性磷酸酶染色及 OCT一4免疫荧光染色鉴定 。3种基础培养基中原 代集落形成率分别为 100 ，100 ，96．3 ；KnockoutDMEM 与 DMEM ／F12中的胚胎干细胞增殖 的速度远快于 h— DMEM 中的增殖速度；单细胞传代 的昆明小 鼠胚胎干细胞都能形成集落 ；经 AKP染色和 OCT一4免疫荧光染色，证 明3种培养体系 中的胚胎干细胞均符合胚胎干细胞 的特性 。KnockoutDMEM 与 DMEM／F12较 DMEM更有利于 胚胎干细胞 的生长 。 关键词 ： 昆明小 鼠；胎干细胞 ；础培养基 中图分类号 ：S814．6 文献标识码 ：A EffectofThreeBasalM ediaonGrowthofKunmingM ouseESC CHEN Shi—bin ，ZHAO Yun—cheng ，KUANG Ling ， YEXiao—fang。，LILi，HUANG Jun—cheng。 (1．CollegeofAnimalMedicine，XinjiangAgriculturalUniversity，Urumqi830052，China；2．Key LaboratoryofAnimal Veterinary，MinistryofEducation，XinjiangAcademyofAnimalScience， Urumqi830000，China；3．CollegeofAnimalScienceandTechnology，ShihhotzeUniversity，Shih— hotze832003，China) Abstract： Thepresentstudyinvestigatedtheeffectsof3basalmedia(h—DMEM ，DMEM ／F12，Knockout DMEM )ongrowthofKunmingmouseembryonicstem cells．TheblastulasofKunmingmousewereinoeu— latedinmediathatcomposedof3basalmediarespectively．Formationrateofprim itiveembryonicstem cell colonywereobserved after4days．Then theresultofculturedmonolpasttransmited from generation tO generationwereobserved．Thesmallembryonicstem cellcolonywascollectedandrespectivelyinoculated intheaboveculturesolutionforfurtherobservation．andtheresultsofstem eel1transmitingfrom genera— tiontogenerationalsowasobserved，whichwereidentifiedbybasicphosphatasedyeandOCT一4immun— ofluoressencedye．Developmentrateofprimitivecolon