一种从薏仁种子中提取出来的抗真菌蛋白.pdfVIP

农业生物技术学报 ，2010年 ，第 18卷 ，第 4期 ，第 689～694页 JournalofAgriculturalBiotechnology，2010，Vo1．18No．4，689～694 ， 研究报告 A Letter 一 种从薏仁种子中提取出来的抗真菌蛋 白 韦璐 ，’许文涛 ，2，’屈伟 梁志宏 王金爱 黄昆仑 1中国农业大学食 品科学与营养工程学院，北京 100083；2农业部转基 因生物食用安全检验监督测试 中心 ．北京 100083 同等贡献作者 籼 通讯作者 ．HKL009@163．conl 摘 要 利用离子交换色谱柱 、亲和层析色谱柱 、凝胶过滤柱和反相高效液相色谱柱 ．从薏仁 (Coixlacrym0一 jobi)种子 中分离纯化出一种抗植物病原真菌的蛋白，经HPLC鉴定纯度为 98．23％。经 SDS—PAGE分析 ，该蛋 白的相对分子质量为25kD。它对链格孢菌 hernariaalternate)、绿色木霉 (Trichodermaviride)和小麦赤霉 (Fusariumgraminearum)有明显抑制作用，其半抑制浓度分别为 9．15、4．50和 12．21ixmol／L。观察该抗真菌蛋 白对霉菌菌丝形态的影响，在透射 电镜下可以看到霉菌细胞壁变厚以及变形 ，细胞壁和细胞膜问间隙变大 ， 细胞壁 出现孔洞，细胞内容物渗出，细胞器受到严重破坏 。 关键词 薏仁 ．抗真菌蛋 白，透射电镜 ANovelAntifungalProteinfromCoixlacryma-jobi WeiLu XuWentao· QuWei LiangZhihong WangJinai HuangKunlun。· 1CollegeofFoodScienceandNutritionalEngineering，ChinaA culturalUniversity，Beijing100083，China；2Supervision，InspectionandTesting CenterofGeneticallyModifiedOrginisms，MinistryofAgriculture，Beijing100083，China Theauthorswhocontributeequally Correspondingauthor．HKL009@163．com DOI：10．3969~．issn．1674—7968．2010．04．010 Abstract A25kDantifungalproteinwasextractedfromCoixlacryma-jobibyammonium sulfateprecipitation， cationexchangechromatography，affinitychromatorgaphy，gelfiltrationandreverse—phaseHPLC，respectively．Its puriytwasidentifiedtobe98．23％byHPLC．Themolecularweightwasdeterminedtobe25kDbySDS．It inhibitedmycelialgrowthinanumberoffungalspeciesincludingAhemariadternate，Trichoderma viride，and F2／8o／-i／zm,groM／~ine0／／／,／／2，withanICsovalueof9．15，4．50and12．21p~mol／L，respectively．Transmissionelectronmi— croscopy ofmycelialofAlternaria alternaterevealedmarkedulrtastructuralchanges，which included cellwall thickeninganddeformation，plasmolysis，cellwallperforated，cellcontentexudatedandcellorganelleseverely damaged． Keywords Coixlaeryma-jobi，Antifungalprotein，TEM 植物生物技术研究 的一个重要 目标就是通过增 基因研究正成为重要课题。Camrona等(1993)将大麦 加农作物的抗性来提高产量 ．抗病育种在世界范围 硫堇基因转入烟草 ，获得 了高抗病烟草 ，检测到的硫 内显得尤为重要 。有关植