一株拮抗放线菌菌株JFA-001的鉴定.pdfVIP

维普资讯 第35卷 第 1期 植 物 保 护 学 报 Vo1．35 No．1 2008年 2 月 ACTA PHYT0PHYLACICA SINICA Feb． 2008 一 株拮抗放线菌菌株 JFA．001的鉴定 IdentificationoftheantagonisticactinomycetestrainJFA_(}01 代 鹏 徐雪莲 唐复润 黄贵修 黄俊生 (中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 ，海南省热带农业 有害生物检测监控重点实验室，海南 儋州571737) DaiPeng XuXuelian TangFumn HuangGuixiu HuangJunsheng (KeyLaboratoryforBalefulBiologyDetectionandMonitorofTropicalAgncultureofHainanProvince，Environment andPlantProtectionInstitute，CATAS．Danzhou571737，HainanProvince，China) 放线菌是具有巨大应用价值的微生物类群。近 周，用十字交叉法测量菌落直径，求出各菌株抑制 年来，利用放线菌产生的抗生素所制备的新农药已 率。以未加过滤发酵液的PDA平板为对照，重复 逐渐成为无公害农药的主体，农用抗生素的筛选和 3次。 应用也已成为农业微生物领域的研究重点，世界各 1．3JFA-O01菌株生理生化测定与形态观察 国对放线菌的研究与资源开发非常重视川。热带 参照文献 [3]对 JFA-O01菌株的碳源利用、明 地区作为一个独特的生态区域，生态环境复杂，植物 胶液化、牛奶凝固与胨化、Hs产生等生理生化指标 种类众多，且气候温暖湿润，对放线菌和病原微生物 进行测定；全细胞壁氨基酸与水解产物糖组分分析 的滋生蔓延十分有利。作者以热带重要病原真菌拮 按 Staneck等 方法进行。利用光学显微镜与透射 抗放线菌为研究对象，从海南部分市县临海沙性土 电镜进行菌株形态与超微结构观察。 壤中分离得到700多份放线菌分离物，从中筛选获 1．4JFA-001菌株分子分析与鉴定 得一株具有广谱抑菌活性的放线菌菌株 JFA-O01， JFA一001菌株DNA的G+C含量测定参照Mar- 并对其进行形态学与分子生物学分类鉴定。 nut等_5方法进行，以大肠杆菌DNA的G+C含量 1材料与方法 为对照。总 DNA的提取参照徐平等 方法进行， 1．1菌株的分离与筛选 PCR产物测序后，利用相关软件进行 16SrDNA扩 从海南省三亚市、琼海市、儋州市和陵水县临海 增序列分析，获得菌株聚类分析结果。 的沙性土壤中采集样品，风干后进行120℃预处理 1 2结果与分析 h；放线菌分离培养基参照文献 [2]制备，高氏一号 2．1JFA-001菌株抗菌活性分析 培养基进行纯化培养。采用管碟法进行拮抗菌株的 14种重要病原真菌的拮抗测定结果发现，JFA一 筛选，获得一株具有广谱抑菌活性的菌株JFA-O01。 001菌株对香蕉枯萎病菌、香蕉冠腐病菌、辣椒黑斑 1．2拮抗菌株发酵液的制备及抗菌活性的测定 病菌等多种病原真菌表现出较强的抑菌活性，抑制 将纯化的菌株分离物用2．5mL无菌水洗下，转 率均在90％以上，对其它供试的病原菌的抑制率也 接入50mL含 1％黄豆饼粉的高氏一号培养液 中，28 均高于70％，表明JFA-