用慢病毒载体介导产生绿色荧光蛋白.PDFVIP

第 卷 第 期 年 月 ’)! ! # $%% # ! ! ! 用慢病毒载体介导产生绿色荧光蛋白 # L7* 转基因小鼠 张敬之 郭歆冰 谢书阳 朱怡文 黄 英 王 舒 任兆瑞 ! ! ! ! ! ! ! ! 上海交通大学医学遗传研究所 上海 # $$$+$ 摘要 以慢病毒$ %载体为骨架!携带绿色荧光蛋白$ %基因的假病毒!通过小鼠受 084@/Z/F3E M?K !! ! ! 精卵卵周隙注射 将其感染小鼠受精卵 经移植于假孕母鼠后获得转基因小鼠 应用 荧光 # KAS ! # 显微镜观察和流式细胞仪分析等技术 证明了M?K基因的整合率达到 +$O 以上 实时定量 KAS 分析结果表明转基因小鼠中 基因整合的拷贝数约为 #染色体荧光原位杂交分析结果显示 M?K +$ 基因在小鼠染色体上的整合是随机的 并通过交配可将外源基因遗传至子代 获得的多整合 M?K ! ! 位点和不同表达水平的转基因小鼠具有明显的实际应用和研究价值 文中报道的慢病毒载体介导 # 的转基因技术为高效制备和选育高表达转基因小鼠品系提供了一种有效的途径# 关键词 慢病毒载体 转基因 小鼠 整合 L7* ! ! ! ! ! ! 转基因小鼠的产生为在个体水平研究基因功能 用慢病毒载体制备转基因小鼠的方法是可行的 可 # ! ! 使外源基因整合率达到 以上 产生的转基因小 提供了一种有效的方法 然而 传统的通过受精卵 # # # +$O 核内注射外源 目的基因来获得转基因小鼠的技术# 鼠可将外源基因遗传至子代#具有明显的实际应用 因其外源基因整合效率仍不够高 限制了其广泛应 价值 # # 用#近年来采用反转录病毒载体感染受精卵来制备 #