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分光光度计的检验 1 指示波长准确度的检验 检验原因:使用过程中,由于振动、温度变 化 、灯座松动、更换灯泡等原 因,出现仪器指示波长与实际波 长出现不符。,导致检测结果不 准确。 检验方法: 可见分光光度区:绘制镨钕滤光片的吸收 光谱曲线。 紫外光区:绘制苯蒸气的吸收光谱曲线。 2 透光度准确度的检验 3 杂散光的检验 4 分辨率的检验 5基线稳定度和平直度的检验 6 吸收池配套性检验 方法: 1)以其中一个吸收池为参比测量其它各池的透光度,其结果偏差小于0.5%的吸收池为一套。 2)在吸收池中装入相同的溶剂,吸光度相同即可成套,若不同可求出修正值后使用。 分光光度计的使用 (1)721型可见分光光度计 ① 检查各调节钮处于起始位置,接通电源,打开样品室暗箱盖,预热20min。 ② 选择调节至所需用波长,并调节相关波长的灵敏档。 ③ 用调“0”电位器调整电表于T=0%,安放参比溶液(第一格)和待测液,盖上样品室盖,拉动拉杆,使参比溶液在光路上时调节“100%”电位器,使电表指针在T=100% ④重复打开样品盖调“0”和盖上样品盖“100%”,直至仪器稳定。 ⑤ 盖上样品盖,拉动拉杆,测量待测液并记录读数。 ⑥ 测量完毕后,取出吸收池,洗净后倒置晾干,各旋钮归位,关闭电源。 (2)754型紫外-可见分光光度计 ① 开机 打开样品室暗箱盖,接通电源,仪器进入自检状态,预热20min后,仪器进入工作状态。 ② 选择光源 仪器开启后,钨灯即亮,若使用紫外区则需打开氘灯。 ③ 调节波长旋钮,选择所需用的单色波长。 ④ 按“100%”键,仪器显示T=0.0。 ⑤ 放入参比溶液和待测液后,盖上样品室盖,将参比液推入光路,按“100%”,仪器显示为100,测量待测液后打印出数据。 ⑥ 测量完毕后,取出吸收池,洗净后倒置晾干,关闭电源。 5 分光光度计的维护和保养 (1)仪器工作环境 仪器应安放在稳固的工作台上,避免周围有强磁场。室内温度:15-28℃,相对湿度:45%-65%,室内不宜有腐蚀性气体,不宜光线过强。 (2)仪器保养 ① 电压 一般为220V,在电压波动较大的实验室,最好有稳压器。 ② 光源 在不用时不要开光源灯,延长光源的使用寿命。要注意及时更换光源不稳的灯泡,更换时不要直接用手接触,以免沾上油污。 ③单色器 勿擅自拆开单色器密封盒,并经常更换单色器盒的干燥剂。 ④吸收池 注意保护吸收池的光学表面。 ⑤光电器件 注意光电器件的受潮积尘,避免强光照射。 人有了知识,就会具备各种分析能力, 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书,广泛阅读, 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识, 培养逻辑思维能力; 通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平, 培养文学情趣; 通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操, 给我们巨大的精神力量, 鼓舞我们前进。 * 第二节 紫外-可见分光光度计 主讲:陈小蒙 1 仪器的基本组件 五大部件: 光源 单色器 样品装置 检测器 信号显示器 光源 1 可见光光源 钨丝灯:最常用的可见光光源,发射波长:325nm~2500nm; 使用范围:320nm~1000nm。 卤钨灯:在钨丝中加入适量的卤化物或卤素。具有较长的寿命和高的发光效率。 2 紫外光光源: 多为气体放电光源:氢灯、氘灯。 氘灯光强比同功率的氢灯要大3-5倍,寿命比氢灯长,在紫外光区广泛使用。 单色器 定义:将光源发出的光分离成所需要的单色光的器件称为单色器。 它是分光光度计的心脏部分。 构成:由狭缝、准直装置、色散元件、透镜 等构成。 狭缝 可分为:入射狭缝和出射狭缝 对单色器的分辨率起重要作用,它对单色光的纯度在一定范围内起着调节作用。 准直和汇聚系统 准直装置:把入射光束转化为平行光束。 汇聚装置:把色散后的光束按波长不同进
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