流式细胞术医.pptVIP

流式细胞术（Flow Cytometry,FCM);1、流式细胞仪(Flow Cytometer):是集光电子物理，光电测量，计算机，细胞荧光化学，单抗技术为一体的高科技细胞分析仪。 2、流式细胞术(Flow Cytometry):利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参数、快速（每秒可达1000-10000个）的定量分析和分选（纯度可达99%以上）的技术。 ;流式细胞仪结构 ;流式免疫分型技术要点;FCM的主要测定指标;FCM标记方法;荧光素种类; PE最强，适用于弱表达抗原 FITC最便宜，适用于强表达抗原，适用范围广 biotin-avidin不适合 弱抗原的检测 ;数据显示方式;流式常见图形 (Histogram Plot);流式细胞的主要信息:Fluorescence;流式常见图形 (Histogram Plot);流式常见图形 (Dot Plot);第二节 流式细胞术的科研应用;流式应用常见范围;抗体标记的方法;抗体的选择;实验对照的设计;空白对照和阴性对照的比较：;实验标本的处理;流式检测应用实例;凋亡检测-每一步都有检测试剂盒;细胞周期;细胞周期不能区分凋亡与死亡细胞 Sub-G0/G1 peaks --- PI staining;Caspases;Annexin V Assay建议用于悬浮细胞;Annexin V Assay能够区分死亡与凋亡;流式“TUNEL”;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Intracellular Cytokine-Protocol;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;SORTING（细胞分选）;DIMER X antigen specific T cell assay method for monitoring cellular response ;CBA(Cytometric Bead Array);Traditional Analysis -- Percent positive;Determination of the CD4 PE ABC on lymphocytes ;第三节 流式细胞术的临床应用;流式细胞白血病免疫分型;流式细胞的免疫分型;FCM应用;细胞增殖周期测定和DNA倍体分析;2）利用DNA的荧光染料，如PI（Propidium iodide碘化丙啶），与细胞内的DNA结合，可反映细胞内DNA含量。采用DNA直方图显示。具有2C DNA含量细胞为G0/G1期细胞，4C DNA含量细胞为G2/M期细胞，DNA含量介于两者之间的细胞为S期细胞。; 3）DNA倍体：主要比较G0/G1期细胞DNA含量的变化。用DNA指数（DI）表示。 DNA指数=测量样本G0/G1期DNA含量/正常人淋巴细胞G0/G1期DNA含量 以正常人淋巴细胞作为对照。 正常细胞DNA指数为1.00，DNA指数＞1，为超2倍体，＜1为亚2倍体，两者可统称为非整倍体。非整倍体细胞中肿瘤的特异性标志，实体肿瘤中出现频率较高。;;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;第四节 凋亡检测;2）DNA链损伤“TUNEL”法 3）Annexin-V-FITC/PI双染法 4）线粒体细胞膜电位的检测 5）凋亡相关基因的检测——免疫标记法检测基因 ;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004