菲克雪浓.docxVIP

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菲克雪浓

菲克雪浓【摘要】 目的 评价菲克雪浓-平衡液为稀释剂的急性等容血液稀释(ANH)对家兔血清IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α等细胞因子的影响,为临床应用提供理论依据。方法 选择20只成年健康家兔,随机分为两组,每组10只:C组为对照组、F组为菲克雪浓组;实验家兔用咪唑安定、氯胺酮麻醉后行气管切开高频喷射通气,游离股动脉、股静脉;C组不进行血液稀释,只维持正常的生理需要量;F组家兔股动脉放血的同时经股静脉输入2倍放血量的稀释液:6%菲克雪浓+复方乳酸钠溶液,晶/胶比为2:1,放血量V=EBV×(Ho-Hf)/Hav,所放血液置于含ACD保养液血袋中保存,于放血后60~120min回输。分别在放血前(T0)、放血后30min(T1)、放血后60min(T2)、放血后120min(T3)、放血后24h(T4)五个时点取静脉血检测Hb、Hct和血清IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α的浓度。结果 F组在ANH后从T1时点开始血清IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α均有增加,各时点与C组间比较有统计学意义;与ANH前自身对照有统计学意义;C组在各时间点的血清IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α变化不大,没有统计学意义。结论 菲克雪浓-平衡液为稀释剂的急性等容血液稀释(ANH)对家兔血清IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α等免疫性细胞因子有上调作用;可引起机体强度不大、作用时间较短的良性应激反应,对机体免疫功能有增强作用。  【关键词】 菲克雪浓-平衡液;血液稀释;应激 急性等容血液稀释(acute normovolemic hemodilution,ANH)是围手术期血液保护的重要措施,在临床上主要用于大手术和估计术中会有大失血可能的病人,而这些病人本身的免疫功能在术前已低于正常。ANH对免疫功能的影响与病人术后的恢复和转归密切相关。本实验采用国产血浆代用品菲克雪浓与平衡液为稀释剂进行急性等容血液稀释,探讨其对家兔ANH前后IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α等免疫细胞因子的影响及其机制,为临床安全应用提供理论依据。   1 资料与方法  1.1 一般资料  20只成年健康家兔,雌雄不拘,体重2.5~3.5kg,按随机数字表法分为两组,每组10只:C组为对照组、F组为菲克雪浓组。实验家兔用咪唑安定0.6mg/kg、氯胺酮12mg/kg肌肉注射麻醉后,行气管切开用KR-II型喷射呼吸机高频喷射通气。用DASH 3000多功能监护仪监测平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)、心率(HR)、脉搏氧饱和度(SpO2)。每60min肌肉注射1/2初量的氯胺酮维持麻醉。游离股动脉、股静脉,动脉用于测压、放血,静脉用于输液、标本采集。F组股动脉放血的同时经股静脉输入2倍放血量的稀释液:菲克雪浓+复方乳酸钠溶液,晶/胶比为2:1。放血量V=EBV×(Ho-Hf)/Hav(EBV为全血容量,按体重的7%计算,Ho为ANH前Hct,Hf为ANH后预期达到的Hct,本实验设定Hf为25%,Hav为Ho与Hf的均值),放血至Hf,所放血液置于含ACD保养液血袋中常温保存,于放血后60~120min回输。C组不进行血液稀释,麻醉及动静脉置管等手术操作与F组动物相同,静脉通道只维持正常的生理需要量,所输液体为复方乳酸钠溶液。  1.2 研究方法  分别在放血前(T0)、放血后30min(T1)、放血后60min(T2)、放血后120min(T3)、放血后24h(T4)抽取静脉血4ml(C组取血时间为相应时间点),2ml检测Hb、Hct,2ml低温高速离心(4℃,3000r/min,4min)后取上清液作为样品,测定兔血清白介素-1(Interleukin-1,IL-1)、白介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)。  1.3 IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α的检测方法  采用双抗夹心ELISA法。原理:抗兔IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α单抗包被于酶标板上,兔标本中的IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α会与单抗结合。加入生物素化的抗兔IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α(二抗),它将与结合在单抗上的兔IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α结合形成免疫复合物,未被结合的将被洗去。辣根过氧化物酶标记的链霉抗生物素蛋白(Streptavidin)将与二抗的生物素(Biotin)结合,多余的物质会被洗掉。加入TMB显色。兔的IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α的浓度与OD值(450nm)成正比。  1.4 统计学处理  计量资料用均数±标准差(x±

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