猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒在伪狂犬病病毒表达系统中表达.pdfVIP

中国兽医学报 年 月 第 卷 第 期 ２０１１ １０ ３１ １０ ＣｈｉｎＪＶｅｔＳｃｉ Ｏｃｔ．２０１１ Ｖｏｌ．３１ Ｎｏ．１０ １３８５ 　 　 　 　 　 　　 　 　 　 　 　 猪细小病毒ＶＰ２蛋白病毒样颗粒在伪狂犬病病毒表达系统中的表达 ＊ ， ， ， ， ， ， （ ， 陈 杨 郭万柱 陈弟诗 徐志文 朱 玲 王 印 王小玉 四川农业大学 动物生物技术中心 　 　 　 　 四川雅安 ） ６２５０１４ ： （ ） ， 摘要 利用 技术从猪细小病毒 株基因组中扩增 全基因 并将其插入真核表达载体 ＰＣＲ ＰＰＶ ＳＣ１ ＶＰ２ ＰＩ２．ＥＧ ｐ － － ， 。 （ ） ＦＰ中 构建转移载体 ＰＩ２．ＥＧＦＰ．ＶＰ２ 采用脂质体介导法将猪伪狂犬病病毒 ＰＲＶ ＳＡ２１５株 ＤＮＡ 与 ＰＩ２． ｐ － ｐ － ， 。 ， ＥＧＦＰ．ＶＰ２ＤＮＡ共转染 Ｖｅｒｏ细胞 待出现细胞病变后收集病毒液 经空斑纯化 并同时采用检测ＰＰＶ ＶＰ２基因 　 ／ 。 的ＰＣＲ方法筛选获得重组病毒ＰＲＶ ＳＡ２１５ ＶＰ２株 以兔抗ＶＰ２ 的多克隆抗体建立的免疫荧光技术可检测到 　 ， ， 。 细胞发出的特异性荧光 表明 成功插入到 基因组中 并获得表达 进一步电镜观察表 Ｖｅｒｏ ＰＰＶ ＶＰ２ ＰＲＶ ＳＡ２１５ 　 　 ， ／ 。 ， 明 感染 的 细胞中可同时观察到 与 种类病毒样颗粒 结果表明 成功实现了 ＰＲＶ ＳＡ２１５ ＶＰ２ Ｖｅｒｏ ＰＲＶ ＰＰＶ ２ 　 　 ， 。 利用ＰＲＶ载体表达 ＰＰＶ ＶＰ２蛋白病毒样颗粒 为进一步研制ＰＰＶ病毒样颗粒疫苗奠定了基础 　 ： ； ； ； 关键词 伪狂犬病病毒 猪细小病毒 ＶＰ２基因 病毒样颗粒 中图分类号：