第七章 脓毒症相关性脑病大鼠海马区神经细胞自噬.PDFVIP

中南大学学报（医学版） 2016, 41(6) J Cent South Univ (Med Sci) 571 DOI:10.11817/j.issn.1672-7347.2016.06.004 /xbwk/fileup/PDF/201606571.pdf 脓毒症相关性脑病大鼠海马区神经细胞自噬 李雅斐，苏云洁，屈艺，母得志，李熙鸿 (四川大学华西第二医院儿童重症医学科，成都 610041) [摘要] 目的：探讨脓毒症相关性脑病(sepsis-associated encephalopathy ，SAE)大鼠海马区神经细胞自噬现象及微管相 关蛋白 1轻链3(LC3) 的表达。方法：盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture ，CLP)建立脓毒症大鼠模型。60只30 日 龄健康雄性Wistar 大鼠被随机分为假手术组(10只)和CLP组(50只) 。CLP后 12 h监测大鼠脑电图(electroencephalogram ， EEG)及体感诱发电位 (somatosensory evoked potential ，SEP) ，并进行神经生物学评分。根据大鼠是否发生SAE将CLP组 大鼠再分为SAE(+)组和SAE(–)组。HE染色观察大鼠海马区病理学改变；电子显微镜观察大鼠海马区神经细胞自噬的 超微结构；Western 印迹检测LC3-I和LC3-II蛋白的表达。结果：50只大鼠在CLP后 12 h内死亡5只，存活45只大鼠中有16 只出现神经行为学、EEG及SEP改变，诊断为SAE ，其发病率为35.56%(16/45) 。与假手术组和SAE(–)组比较，SAE(+) α δ P 组大鼠在CLP后 12 h时 波的频率明显减少， 波增加，P1振幅下降，P1波和N1波潜伏期延长( 0.05) 。CLP后 12 h时 SAE(+)组大鼠海马区细胞明显水肿，锥体细胞明显减少，甚至溶解，细胞排列紊乱，而假手术组和SAE(–)组大鼠海 马区细胞形态正常、层次清楚。透射电子显微镜观察表明：SAE(+)组大鼠海马区细胞结构紊乱，可见自噬泡、颗粒 状基质和方形或长方形晶体，自噬泡内含有溶酶体等细胞器，假手术组和SAE(–)组大鼠海马区组织细胞无自噬泡形 成。SAE(+)组大鼠在CLP后 12 h ，海马区神经细胞LC3-II/LC3-I值明显高于假手术组和SAE(–)组(P 0.05)。结论：SAE 大鼠海马区神经细胞存在细胞自噬现象，LC3-II/LC3-I值明显升高。 [关键词] 脓毒症相关性脑病；海马；自噬；微管相关蛋白 1轻链3 Autophagy in hippocampal nerve cells from rats with sepsis-associated encephalopathy LI Yafei, SU Yunjie, QU Yi, MU Dezhi, LI Xihong (Pediatric Intensive Care Unit, West China Second University Hospital, Sichuan University, Chengdu 610041, China) ABSTRACT Objective: To show evidence of the autophagy in hippocampal nerve cells from rats with sepsis- associated encephalopathy (SAE) in vivo and to investigate the expression of microtubule-