聚丙烯酰胺凝胶双向电泳解析.pptVIP

* 聚丙烯酰胺凝胶双向电泳 第一部分 实验简介 一、实验目的 通过双向电泳实验，初步掌握电泳的基本理论、双向电泳实验的设计原理和实验技能。 二、实验原理 根据不同的蛋白质具有不同的分子量和等电点的特点。利用这一性质首先通过毛细管聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术将不同等电点的蛋白质分开，然后通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳将相同或相近等电点而分子量不同的蛋白质进行相对分子量分离。经过二维电泳分离的蛋白质在二维电泳图谱所处的位置，就是该蛋白质的相对分子量和等电点。 三、实验流程 蛋白样品的制备 ↓ 等电聚焦凝胶溶液的配制 ↓ 灌注毛细管凝胶 ↓ 组装第一向电泳槽 ↓ 聚焦电泳 ↓ 停止电泳 ↓ 取出毛细管胶 ↓ 毛细管胶置平衡液中平衡 ↓ 组装第二向电泳槽 ↓ 配制SDS-丙烯胺凝